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bswhan

铜虫 (初入文坛)

[求助] 基因组跑胶 已有4人参与

求助我的基因组跑成这样是啥原因啊?之前提的没有问题,近期老是这样,PCR也会出现杂带,望大神帮帮忙,谢谢

基因组跑胶
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小豆子J

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
bswhan(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-15 13:00:26
之前提的没有问题,说明操作上问题不大,那就可能是菌体老化或者提取试剂出了问题,试剂的问题多数会出在菌体裂解部分。

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3楼2014-08-15 08:57:43
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a50044758

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
bswhan(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-15 13:00:15
基因组不纯,因为你的Marker正常,但是基因组有拖尾,里面的蛋白,多糖没除干净,你把你的基因组用酚仿抽提几遍就好了!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2014-08-15 01:16:17
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bswhan

铜虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by a50044758 at 2014-08-15 01:16:17
基因组不纯,因为你的Marker正常,但是基因组有拖尾,里面的蛋白,多糖没除干净,你把你的基因组用酚仿抽提几遍就好了!

你好,我是用试剂盒提的基因组,之前的操作都没有换过,你说的酚仿抽提具体的操作,能详细告诉我吗
4楼2014-08-15 10:29:24
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bswhan

铜虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小豆子J at 2014-08-15 08:57:43
之前提的没有问题,说明操作上问题不大,那就可能是菌体老化或者提取试剂出了问题,试剂的问题多数会出在菌体裂解部分。

菌体老化,我这边用的菌应该30度培养,我37度培养的,12个小时后用的,影响会很大吗?裂解剂我用的自己配的溶菌酶,也是刚配的,问题应该不是很大。我用这次的基因组PCR产物,除了主带,还有好几个条带,之前没有这样的问题的,我应该从哪里找原因呢
5楼2014-08-15 10:32:16
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