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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 蛋白在云母表面的吸附力强吗？
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酷恋花

木虫 (正式写手)

[求助] 蛋白在云母表面的吸附力强吗？ 已有1人参与

想用原子力对云母上的蛋白成像，可是涉及到除盐的问题，不知道云母对蛋白吸附能力如何，用清水清洗会不会把蛋白液洗掉了···已经卡了好久了，先给大神跪拜一个···
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莫懈怠，时间不多了！
1楼 2014-08-14 11:13:51
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
图发不上去，只好另开一帖传图。

图1.“Types of hydroxyl group on silica surfaces. These are four possible types of SiOH groups on silica surfaces in which only the geminal and isolated silanols（硅醇） are reactive. Siloane(硅氧烷)和Vicinal silanol（硅醇）是没有反应活性的。”（图1及其说明文字引自：A.Cass and F.Ligler edit,Immobilized Biomolecules in Analysis—A Practical Approach,Oxford University Press,1999,3）这也就是说要在玻璃表面形成有反应活性的geminal silanol and isolated silanol这两种硅醇，而Siloane(硅氧烷)和Vicinal silanol是没有反应活性的。


图2（引自：A.Cass and F.Ligler edit,Immobilized Biomolecules in Analysis—A Practical Approach,Oxford University Press,1999,76）
Figure 2“ (a) A diagram of an aminosilane molecule is depicted (/eft), (b) The reaction of the aminosilane's methoxy groups（氨基硅烷的甲氧基基团） is shown (right), where x can be the glass surface, hydrogen (i.e. water), or another aminosilane（氨基硅烷） molecule. The role of water in determining the extent of cross-linking with other aminosilane（氨基硅烷） molecules is apparent from this schematic.”（图2的文字说明引自：A.Cass and F.Ligler edit,Immobilized Biomolecules in Analysis—A Practical Approach,Oxford University Press,1999,76）
蛋白在云母表面的吸附力强吗？
图1.JPG


蛋白在云母表面的吸附力强吗？-1
图2.JPG
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酷恋花
15楼2014-08-23 20:42:45
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
酷恋花: 金币+20, ★★★★★最佳答案, 感谢分享 2014-08-14 12:32:26
引号内的内容摘自：http://baike.sogou.com/v267613.htm
“云母属于铝硅酸盐矿物，具有连续层状硅氧四面体构造。分为三个亚类：白云母、黑云母和锂云母。白云母包括白云母及其亚种(绢云母)和较少见的钠云母；黑云母包括金云母、黑云母、铁黑云母和锰黑云母；锂云母是富含氧化锂的各种云母的细小鳞片。工业上尤其是电气工业中常用的是白云母和金云母。
白云母的化学式为KAl2〔AlSi3O10〕〔OH〕2，其中SiO2 45.2%、Al2O3 38.5%、K2O 11.8%、H2O 4.5%，此外，含少量Na、Ca、Mg、Ti、Cr、Mn、Fe和F等。
金云母的化学式为KMg3〔AlSi3O10〕〔F，OH〕2，其中K2O 7～10.3%、MgO为21.4～29.4%、Al2O3为10.8～17%、SiO2为38.7～45%、H2O为0.3～4.5%，含少量Fe、Ti、Mn、Na和F等。”
针对楼主的问题，对于云母的其他性质，我不太关心，我主要关心的是云母中哪些成分可以用于固定化蛋白质。白云母里含有SiO2 45.2%金云母里含SiO2为38.7～45%、H2O为0.3～4.5%，这是我比较有兴趣的。因为普通玻璃的成分主要是二氧化硅(SiO2，即石英，砂的主要成分)，而在玻璃上通过共价与非共价的吸附作用是可以将蛋白质固定在玻璃板上的，而且硅片上固定化蛋白质本身就是制备蛋白芯片的一种生产工艺。
所以云母对蛋白吸附能力是足够大的，而且有可以形成共价键的固定化蛋白质与硅片或者玻璃片（主要成分是SiO2，即石英，砂的主要成分)，用清水清洗不会把蛋白液洗掉了，能形成共价键怎么可能用水系的掉哪。
具体的反应机制和反应的protocols,我一时想不起来了。
你可以查一下：
Greg T. Hermanson，Bioconjugate Techniques，Elsevier Inc，2013，3rd edition
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=6709686

你这个问题挺有意思，因为解决此问题的技术就是纳米生物学的一种关键技术，比如在生物芯片制备过程中必须要把各种生物大分子固定在无机物的介质上。我也去好好查查资料，再来回复你。
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2楼2014-08-14 12:01:16
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
此文我已经加入到了我在本月底发布在本版的“小木虫生物综合版与分子生物版冷点问题讨论——凌波丽 个人总结 第六季”的文章里，目前该文共有69231个字，A4纸98页，约含有70个问题的讨论。

我会在本月底以前回复楼主。因为过了本月底，我就飞米国了。再在小木虫论坛见到我，最快也是明年的春节前后。

楼主的问题问的挺有水平！欢迎继续讨论。
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3楼2014-08-14 12:12:16
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酷恋花

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2014-08-14 12:01:16
引号内的内容摘自：http://baike.sogou.com/v267613.htm
“云母属于铝硅酸盐矿物，具有连续层状硅氧四面体构造。分为三个亚类：白云母、黑云母和锂云母。白云母包括白云母及其亚种(绢云母)和较少见的钠云母；黑云母 ...

好专业啊～小木虫真是卧虎藏龙啊！那就是说我的蛋白滴到白云母上就能很好地吸附了呗？应该不至于直接形成共价键吧？总之，先把奖励给你……楼下如果也有好的回答我再追加悬赏～

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莫懈怠，时间不多了！
4楼2014-08-14 12:30:36
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