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zhoujk0520

木虫 (正式写手)

[求助] 求助谁用过QIIME分析Miseq数据?跪求帮助 已有1人参与

学习环境微生物,最近研究QIIME分析。按着官网上的流程和官网提供的454与Illumina的Example跑了一遍数据都没有问题。

可是现在有个问题。手头有个Illumina的Example的数据,Fastq格式,这个与官网上的数据不大一样,没有Mapping File。对于Miseq测序的最终生成结果我不是特别了解。请问最终生成的数据应该是仅仅只有一个Fastq文件么,没有 一个能包含Barcode信息和Primer信息的Mapping File么?
如果这样的话,仅有一个Fastq文件(Fastq包含了碱基和质量分数文件以及Barcode),可是这样的话,官网流程上的check mapping File这一步就不用了吧,而且接下来的 Split library这一步又怎么进行呢?
Fastq的去杂和拼接又该怎么进行呢?

求助各位大神!这个问题困扰了几天,没有解决很是着急。这肯定跟我自己的基础理论知识不够全面有关,可是在摸索QIIME的路上一个人确实是有点力不从心。希望各位大神能给予指点
谢谢谢谢!!
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zhoujk0520

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by peterrjp at 2014-10-21 14:53:25
miseq的数据用qiime做其实也很简单,除了下机文件一个是sff,一个是fastq,其他跟454流程一样。测序公司一般会同时提供一个大fastq和若干用barcode分开后的小fastq,也会给你barcode和primer信息。你用大的fastq分析 ...

差点忘了!!
太感谢啦!!!!
3楼2014-11-25 11:11:09
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peterrjp

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

miseq的数据用qiime做其实也很简单,除了下机文件一个是sff,一个是fastq,其他跟454流程一样。测序公司一般会同时提供一个大fastq和若干用barcode分开后的小fastq,也会给你barcode和primer信息。你用大的fastq分析就好。
qiime的convert_fastaqual_fastq.py脚本可以转化fastq为fasta和qual文件,例如:
convert_fastaqual_fastq.py -c fastq_to_fastaqual -f your.fastq
其余步骤和454一样的。
2楼2014-10-21 14:53:25
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