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damaolehehe

木虫 (著名写手)

[求助] 流动相中的这些组成都起什么作用? 已有2人参与

一成型的液相方法流动相的组成为   盐溶液(三羟甲基氨基甲烷和庚烷磺酸钠):乙腈:三乙胺   用盐酸调PH至7  请问其中三羟甲基氨基甲烷和庚烷磺酸钠以及三乙胺分别起什么作用? 为什么要调ph至中性呢?
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hhgmaizi

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
由于高效液相色谱中流动相是液体,它对组分有亲和力,并参与固定相对组分的竞争。因此,正确选择流动相直接影响组分的分离度。对流动相溶剂的要求是:(1)溶剂对于待测样品,必须具有合适的极性和良好的选择性。(2)溶剂要与检测器匹配。对于紫外吸收检测器,应注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长要长。所谓溶剂的紫外截止波长指当小于截止波长的辐射通过溶剂时,溶剂对此辐射产生强烈吸收,此时溶剂被看作是光学不透明的,它严重干扰组分的吸收测量。可以在网上搜索一下溶剂的紫外截止波长。对于折光率检测器,要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相,以达最高灵敏度。(3)高纯度。由于高效液相灵敏度高,对流动相溶剂的纯度也要求高。不纯的溶剂会引起基线不稳,或产生“伪峰”。痕量杂质的存在,将使截止波长值增加50~IOOnm。(4)化学稳定性好。不能选与样品发生反应或聚合的溶剂。(5)低粘度。若使用高粘度溶剂,势必增高压力,不利于分离。常用的低粘度溶剂有丙酮、乙醇、乙晴等。但粘度过于低的溶剂也不宜采用,例戊烷、乙醚等,它们易在色谱柱或检测器内形成气泡,影响分离.
希望是火,失望是烟,生活总是在一边点着火,一边冒着烟。
2楼2014-08-12 14:56:32
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hhgmaizi

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般来说流动相都是怎样确定的
1、国内有上市品种,主要参考国家标准(药典、部颁、注册标准等)及国内外文献;

2、国外有上市,国内无上市,主要参考国外标准(USP、EP、BP、JP等)及国外文献;

3、国内外均无上市的,就是1类新药了,没什么好说的,所有的靠自己研究,基本无可供参考的资料。
希望是火,失望是烟,生活总是在一边点着火,一边冒着烟。
3楼2014-08-12 15:00:22
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yumulin

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
damaolehehe: 金币+5, 非常感谢~方法开发难度很大呀~ 2014-08-14 10:25:57
三羟甲基氨基甲烷和庚烷磺酸钠 是缓冲液,在我们使用特定PH值的时候需要;三乙胺扫尾剂,一般用来调节峰型,避免拖尾;
调PH值可能是因为在该PH值条件下分离分析效果最好啊。

这些都是方法开发的一部分,你找的已有方法一定是别人通过尝试不同PH值,不同流动相条件验证过的,方法确认的;在该条件下分析效果最好
4楼2014-08-13 20:08:24
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