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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒
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zzqblue

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒 已有1人参与

请问pEGFP-N3，pcDNA3.1/myc-His(-)A和pcDNA3.1-flag有什么区别，其中的N3，myc, his和flag分别起什么作用。
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1楼 2014-08-11 18:32:38
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader
引用回帖:
5楼: Originally posted by zzqblue at 2014-08-12 20:42:29
一般做这种质粒的载体构建的时候是交给公司做还是自己完成？...

你是说用这些空载体进行构建？我们都是自己做的，从不找公司做。
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6楼2014-08-13 09:45:01
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zzqblue: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-08-14 16:59:31
每个载体都是有些许差异，这三个都是mammalian expression vectors，就是都可以用于哺乳细胞中的表达。其中pEGFP－N3带有EGFP标签，构建融合蛋白后可以直接在荧光显微镜下观察融合蛋白的表达分布情况。而后二者都是pcDNA3.1的衍生，pcDNA3.1/myc-His(-)A带有Myc和His tags，而pcDNA3.1-flag则带有Flag tag。这些tags如要便于将来的进一步检测（这些tags都有相应抗体）。
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2楼2014-08-11 21:06:44
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zzqblue

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-11 21:06:44
每个载体都是有些许差异，这三个都是mammalian expression vectors，就是都可以用于哺乳细胞中的表达。其中pEGFP－N3带有EGFP标签，构建融合蛋白后可以直接在荧光显微镜下观察融合蛋白的表达分布情况。而后二者都是 ...

我在看文献的时候看到这个his tag有（+）还有（-）同时还分A、B、C请问这些有什么区别？
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3楼2014-08-12 10:22:47
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader
引用回帖:
3楼: Originally posted by zzqblue at 2014-08-11 21:22:47
我在看文献的时候看到这个his tag有（+）还有（-）同时还分A、B、C请问这些有什么区别？...

+/-通常是多克隆位点部位的顺序方向相反。
至于ABC等我说不清楚，如真有这种情况，需要看vector的具体说明书。
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4楼2014-08-12 10:25:27
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