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哇哇乱叫

铜虫 (小有名气)

[求助] 有人在用QIAGEN的Epitect bisulfite kit做甲基化 吗?在线急求。

甲基化试验中用该试剂盒,盐处理之后纯化再pcr。但是pcr出来几乎没有东西,6-12个循环都试过了,浓度都低得可怜,大概就0.1ng/ul,感觉pcr就没有起到效果。如果是盐处理之后浓度很低的话,pcr循环增多应该能提高下浓度啊。感觉就是pcr没起效果。想了下,就只有接头和引物会有问题。因为是先加接头再盐处理,会不会是盐处理过程中接头甲基化了然后pcr过程中不能跟引物结合。已经重复好多次做了好多对照了。心都碎了。打断的话150bp,250bp,350bp都试过,区别不大。
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