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bijiaoyingyang

金虫 (小有名气)

[交流] 求助

求助各位师兄(姐,弟,妹):
     我最近在做外源重组基因在酵母KM71中的诱导表达，但是菌液生长两天后，OD值始终在2.2--2.6之间，再继续培养一天，OD值也只有微小的增长，但是绝对到不了3。 菌液看上去很浓稠了，就是OD值小。当然YPD培养液和OD值测定都已经核查过多次了，没有问题。
     请大家帮忙给看看，指点迷津！！谢谢。
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1楼 2008-04-09 17:25:38
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yellow.

是不是溶氧有限呀？
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3楼2008-04-14 09:59:09
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bijiaoyingyang

金虫 (小有名气)

继续求助（补充说明）

存在“OD值始终在2.2--2.6之间，到不了3， 菌液看上去很浓稠了”这个问题。所以在蛋白质纯化时，很难得到目的蛋白或者极其少。实际是经常得不到，我个人估计就是因为OD值太低。但是，很多文章报道很容易把OD值摇到5--6的，而且在诱导的第3天就会出现表达高峰。
      而我摇的OD值始终在2.2--2.6之间，在第6天才会有高峰出现，且绝大多数为非目的蛋白。因为我在诱导的第3，4，5天都用SDS-PAGE 电泳检测过，基本没有目的蛋白出现。
     望指点！谢谢。Sample Text
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2楼2008-04-09 17:35:00
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