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hida

银虫 (小有名气)

[求助] 生物素亲和素放大效果的疑问 已有3人参与

大家觉得biotin-IgG strepavidin-AP 放大倍数与strepavidin-IgG,biotin-AP相比哪个更大一点呢?
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gu666hong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-08-05 13:10:38
前者吧,看了很多文献都是说的生物素标记IgG的,
2楼2014-08-05 11:02:57
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hida

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gu666hong at 2014-08-05 11:02:57
前者吧,看了很多文献都是说的生物素标记IgG的,

是啊,文献上基本没有亲和素标记抗体,但是为什么呢?
3楼2014-08-05 15:54:08
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-08-06 16:27:19
我觉得是因为生物素分子量比较小,标记到抗体上后对抗体构象影响不大。亲和素是四聚体,总分子量有60多KD,要是连到抗体上估计会封闭抗体的结合位点。
4楼2014-08-05 23:43:59
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-08-06 16:27:34
1个亲和素最多可以结合4个生物素
5楼2014-08-06 15:56:59
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hida

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-08-06 15:56:59
1个亲和素最多可以结合4个生物素

理论上是这样的,但实验起来,亲和素标记抗体,生物素标记AP的实验效果并不理想,苦恼中
6楼2014-08-13 16:36:35
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ayiyaya

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by hida at 2014-08-13 16:36:35
理论上是这样的,但实验起来,亲和素标记抗体,生物素标记AP的实验效果并不理想,苦恼中...

楼主还在做亲和素-生物素放大系统么?我最近也在做,结果放大效果并不明显,不知道楼主有没有什么经验???求分享~
7楼2015-09-22 14:24:45
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