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charles08

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 问题:蛋白电泳PAGE胶不凝固?+孔道形成比较短? 已有3人参与

问题一:一面是自己配置的分离胶加上160微升APS和12微升TEMED后倒胶,2小时后仍然不凝固,工作外界温度为33度
         另外做对照用从碧云天买的29:1丙烯酰胺和PH8.8溶液配置的分离胶加入相同的APS和TEMED,2小时候凝固,但是胶面有所下移
      不知原因是什么?自己配置是按分子克隆上的配方来的

问题二:用配好的分离胶上加入PH6.8做浓缩胶,倒好后凝固发现孔径下移,形成较短(放入冰箱也出现浓缩胶浓缩形成孔道短了半截,原来冬天不存在这个问题)不知如何解决这个问题,请高手赐教,谢谢!
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charles08

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by ShawRr at 2014-08-06 16:16:34
环境温度30度的时候一般10min之内是可以凝的,我之前也出现过半个小时不凝的时候,后来换了同学的AP用,5min就凝了,建议你换AP试试(你之前的AP可能已经失效了,新配也没有多大作用)

不知怎么验证APS怎么才是没有失效的?

我每次都是从那个瓶子里取的样品,药品颗粒很白似乎还挺好的
7楼2014-08-08 09:43:33
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
charles08(youlinglyw代发): 金币+3, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-08-06 15:17:18
1、适当增加TEMED和APS用量;
2、APS要新鲜配制。
2楼2014-08-04 21:08:28
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charles08

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-04 21:08:28
1、适当增加TEMED和APS用量;
2、APS要新鲜配制。

量有 蛮多了哦,坛子里加这么多少吧

APS是新配的
3楼2014-08-05 08:50:28
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kimi2000

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
charles08(youlinglyw代发): 金币+3, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-08-06 15:17:27
本帖内容被屏蔽

4楼2014-08-06 09:54:52
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