应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 问题：蛋白电泳PAGE胶不凝固？+孔道形成比较短？
151/2返回列表12下一页
查看: 2859  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

charles08

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 问题：蛋白电泳PAGE胶不凝固？+孔道形成比较短？ 已有3人参与

问题一：一面是自己配置的分离胶加上160微升APS和12微升TEMED后倒胶，2小时后仍然不凝固，工作外界温度为33度
         另外做对照用从碧云天买的29:1丙烯酰胺和PH8.8溶液配置的分离胶加入相同的APS和TEMED，2小时候凝固，但是胶面有所下移
      不知原因是什么？自己配置是按分子克隆上的配方来的

问题二：用配好的分离胶上加入PH6.8做浓缩胶，倒好后凝固发现孔径下移，形成较短（放入冰箱也出现浓缩胶浓缩形成孔道短了半截，原来冬天不存在这个问题）不知如何解决这个问题，请高手赐教，谢谢！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-08-04 18:31:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

charles08

铁杆木虫 (著名写手)
问题解决了，原因是：药品失效

崩溃！

就好比查电脑问题最后发现是接触不良的原因。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2014-08-08 10:47:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逍潇

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by charles08 at 2014-08-08 15:23:13
AP容易吸湿失效吗？

我是AP和TEMED两个都换了

我们这边TEMED用了很久了，好几年了，都有带黄色了。所以我怀疑TEMED问题大些...

AP放冰箱里还好，不是很容易吸湿。我们实验室的TEMED也用了好几年，不过没有带黄色。保险起见你最好都换新的，用的时候分装出来，不要每次用都在原瓶里面取。
赞一下(1人) 回复此楼
14楼2014-08-08 17:13:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
charles08(youlinglyw代发): 金币+3, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-08-06 15:17:18
1、适当增加TEMED和APS用量；
2、APS要新鲜配制。
赞一下 回复此楼
2楼2014-08-04 21:08:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-04 21:08:28
1、适当增加TEMED和APS用量；
2、APS要新鲜配制。

量有 蛮多了哦，坛子里加这么多少吧

APS是新配的
赞一下 回复此楼
3楼2014-08-05 08:50:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kimi2000

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
charles08(youlinglyw代发): 金币+3, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-08-06 15:17:27
本帖内容被屏蔽
4楼2014-08-06 09:54:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ShawRr

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
环境温度30度的时候一般10min之内是可以凝的，我之前也出现过半个小时不凝的时候，后来换了同学的AP用，5min就凝了，建议你换AP试试（你之前的AP可能已经失效了，新配也没有多大作用）
赞一下 回复此楼
5楼2014-08-06 16:16:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by kimi2000 at 2014-08-06 09:54:52
TEMED多放点，胶面下移是不是没夹紧漏掉了。 一般我从洗板子制胶到拔梳子也就一小时多一点，两小时还不凝固是不是制胶的各成分中有问题了。

按您的经验，制胶成分哪个最容易出问题？
赞一下 回复此楼
6楼2014-08-08 09:41:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ShawRr at 2014-08-06 16:16:34
环境温度30度的时候一般10min之内是可以凝的，我之前也出现过半个小时不凝的时候，后来换了同学的AP用，5min就凝了，建议你换AP试试（你之前的AP可能已经失效了，新配也没有多大作用）

不知怎么验证APS怎么才是没有失效的？

我每次都是从那个瓶子里取的样品，药品颗粒很白似乎还挺好的
赞一下 回复此楼
7楼2014-08-08 09:43:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ShawRr at 2014-08-06 16:16:34
环境温度30度的时候一般10min之内是可以凝的，我之前也出现过半个小时不凝的时候，后来换了同学的AP用，5min就凝了，建议你换AP试试（你之前的AP可能已经失效了，新配也没有多大作用）

谢谢您的提醒，查明是药品问题
赞一下 回复此楼
9楼2014-08-08 10:48:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ShawRr

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by charles08 at 2014-08-08 10:48:15
谢谢您的提醒，查明是药品问题...

我以前也被这个问题困扰好久
赞一下 回复此楼
10楼2014-08-08 12:37:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 charles08 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭