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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 加了酶切位点和保护碱基的引物Tm值计算及PCR问题。急急急
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北化方华

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
20楼: Originally posted by happydove at 2014-08-06 15:10:48
happydove_2008@126.com...

发你了
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21楼2014-08-06 16:14:55
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BIOTITAN2009

金虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 北化方华 at 2014-08-05 17:46:49
kpn1和xho1，加上最合适的保护碱基。就达30度了
A-F        CGGGGTACC     ATGAACGACCAAACGCAATT
A-R        CCGCTCGAG     TTAATCTAGGTCATCATCAATT
B-F        CCGCAGTACT    ATGACCACCACTGCCCAA
B-R        CCGCTCGAG      TCAAACCTTTGCG ...

AF的PCR使用温度为60.4，AR为57.7，BF为61.9，BR为63.6，使用时取各对引物F与R的平均值进行。不知道你怎么算的，怎么可能达到80度
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Ignorance is infinite.
22楼2014-08-07 14:38:41
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