应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » EMSA/ChIP » ChIP菜鸟，请问大神们阴性抗体Ig G（兔和鼠）怎么选，你们都是哪家公司的？
51/1返回列表
查看: 2335  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zmlustc

铁虫 (初入文坛)

[求助] ChIP菜鸟，请问大神们阴性抗体Ig G（兔和鼠）怎么选，你们都是哪家公司的？ 已有1人参与

本实验室的santa的Ig G浓度低，而且试过背景有点高。求指点推荐你们觉得使用效果不错的适合做ChIP鼠和兔的Ig G呀！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-08-04 10:30:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by zmlustc at 2014-08-04 06:01:45
确实是荧光定量PCR的产物很高，如你所说可能是sonication的问题，但是我每次超声的片段跑DNA胶确实是500bp左右，挺合适的呀！...

可尝试：
1）IP的时候洗的彻底一些、抗体及细胞裂解液用量少些。
2）先用normal IgG pre-clear一下，然后再按正常步骤进行IP。

其实：
如果IgG control和目的蛋白的抗体间IP后PCR有明显差异，则问题不大，只要调整PCR循环数就可以降低IgG control的水平。另外如果这个差别存在，也可以用QPCR进行定量。
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-04 21:06:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-08-04 14:14:51
IgG control的选择取决于你所用于ChIP抗体的来源，如ChIP时用的兔（多抗）则只能选用normal rabbit IgG做对照，而且用量要一样。Santa Cruz的各种属normal IgG我都用过，应该可用。另外，你的背景有点高是什么含义？是PCR产物吗？若如此，一般不是抗体的问题，更可能是sonication的问题。
赞一下 回复此楼
2楼2014-08-04 11:15:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zmlustc

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-04 11:15:38
IgG control的选择取决于你所用于ChIP抗体的来源，如ChIP时用的兔（多抗）则只能选用normal rabbit IgG做对照，而且用量要一样。Santa Cruz的各种属normal IgG我都用过，应该可用。另外，你的背景有点高是什么含义？ ...

确实是荧光定量PCR的产物很高，如你所说可能是sonication的问题，但是我每次超声的片段跑DNA胶确实是500bp左右，挺合适的呀！
赞一下 回复此楼
3楼2014-08-04 19:01:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zmlustc

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-04 21:06:28
可尝试：
1）IP的时候洗的彻底一些、抗体及细胞裂解液用量少些。
2）先用normal IgG pre-clear一下，然后再按正常步骤进行IP。

其实：
如果IgG control和目的蛋白的抗体间IP后PCR有明显差异，则问题不大，只 ...

我做的就是QPCR，Ig G control和目的蛋白抗体间没有明显差别，反而还略高，倒是阳性抗体很高，比他们俩高很多。
赞一下 回复此楼
5楼2014-08-05 09:05:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 环境工程调剂 +9 大可digkids 2026-03-16 9/450 2026-03-20 17:38 by 醉在风里
[考研] 289求调剂 +3 怀瑾握瑜l 2026-03-20 3/150 2026-03-20 16:17 by Iveryant
[考研] 085600材料与化工 +6 安全上岸！ 2026-03-16 6/300 2026-03-20 15:07 by lbsjt
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +21 rare12345 2026-03-18 21/1050 2026-03-20 14:31 by 无懈可击111
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +4 Charlieyq 2026-03-19 4/200 2026-03-20 14:26 by 无懈可击111
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +4 西南交通专材355 2026-03-19 4/200 2026-03-20 11:39 by 花开富贵幸福人�
[考研] 317求调剂 +4 申子申申 2026-03-19 8/400 2026-03-20 11:20 by 申子申申
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂（0854都可以） +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +14 陌の森林 2026-03-18 14/700 2026-03-19 22:38 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿天大材料与化工（085600）总分338 +5 蔡大美女 2026-03-13 5/250 2026-03-19 10:44 by 是小刘呀～
[考研] 330求调剂 +3 小材化本科 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:55 by 无懈可击111
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +3 生物工程调剂 2026-03-17 7/350 2026-03-18 20:41 by Wangjingyue
[考研] 材料专硕306英一数二 +10 z1z2z3879 2026-03-16 13/650 2026-03-18 14:20 by 007_lilei
[考研] 299求调剂 +5 △小透明* 2026-03-17 5/250 2026-03-18 11:49 by 尽舜尧1
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
[考研] 268求调剂 +6 简单点0 2026-03-17 6/300 2026-03-18 09:04 by 无际的草原
[考研] 301求调剂 +9 yy要上岸呀 2026-03-17 9/450 2026-03-18 08:58 by 无际的草原
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭