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静谧limi

铜虫 (小有名气)

[求助] 单交换问题 已有2人参与

最近在做某种链霉菌与携带外源基因的载体发生单交换,使其插入失活,但是电转化之后一直不长菌,不知道什么原因,重复做了两次,有哪位大师做过相关类实验,可以指导指导吗?
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上游生命科学

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-08-15 11:55:58
你应该是利用链霉菌自身的重组酶系统进行单交换重组吧,这样的话重组效率取决于链霉菌本身的重组酶效率,效率高的很容易,低的就相对困难,不过多做几次,加大量应该都能单交换上去
2楼2014-08-15 10:42:16
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nl2016

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

载体上携带的同源臂有多长呢?为什么不用接合转移呢?
3楼2014-08-16 10:11:40
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