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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » pUC18质粒用M13引物检测吗？
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kristina_1982

新虫 (初入文坛)

[交流] pUC18质粒用M13引物检测吗？

M13引物的序列是什么
在pUC18质粒上的特异结合为点在哪啊？
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1楼 2008-04-08 15:59:34
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renzhesichen

铁虫 (小有名气)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
不知楼主要检测什么？
是否有有插入片段吗？
可以到下面的网页看看。里面有M13系列测序引物的序列以及在质粒上结合位点！
http://www.takara.com.cn/product/2007/l/L-8FH11001.html
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2楼2008-04-08 18:13:34
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kristina_1982

新虫 (初入文坛)
普通的转化实验，将提取的pUC18质粒转入JM109感受态细胞中，除了用抗生素筛选法，是否可用M13检测阳性重组子
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3楼2008-04-09 08:09:29
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renzhesichen

铁虫 (小有名气)
可以用M13检测阳性重组子，以菌液为模版，M13 Primers M3/RV为引物，做PCR就可以，退火温度，48度就可以！
电泳一条带是阳性单克隆，
两条带是非单克隆，
没条带是假阳性！
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4楼2008-04-09 08:30:37
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kristina_1982

新虫 (初入文坛)
是用M13 Primer M3或RV还是两个一起用做上下游引物呢？
如果要人工合成的话，就按上面链接里的序列就可以了是吗？
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5楼2008-04-11 07:49:11
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kristina_1982

新虫 (初入文坛)
用T3 primer或T7 primer也可以吗？
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6楼2008-04-11 08:25:28
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renzhesichen

铁虫 (小有名气)
两个一起用，只要是配套的正反向测序引物就可以！
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7楼2008-04-11 08:47:39
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kristina_1982

新虫 (初入文坛)
非常感谢！！
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8楼2008-04-11 09:05:10
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