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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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kristina_1982

新虫 (初入文坛)

[交流] pUC18质粒用M13引物检测吗?

M13引物的序列是什么
在pUC18质粒上的特异结合为点在哪啊?
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renzhesichen

铁虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
不知楼主要检测什么?
是否有有插入片段吗?
可以到下面的网页看看。里面有M13系列测序引物的序列以及在质粒上结合位点!
http://www.takara.com.cn/product/2007/l/L-8FH11001.html
2楼2008-04-08 18:13:34
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kristina_1982

新虫 (初入文坛)

普通的转化实验,将提取的pUC18质粒转入JM109感受态细胞中,除了用抗生素筛选法,是否可用M13检测阳性重组子
3楼2008-04-09 08:09:29
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renzhesichen

铁虫 (小有名气)

可以用M13检测阳性重组子,以菌液为模版,M13 Primers M3/RV为引物,做PCR就可以,退火温度,48度就可以!
电泳一条带是阳性单克隆,
两条带是非单克隆,
没条带是假阳性!
4楼2008-04-09 08:30:37
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kristina_1982

新虫 (初入文坛)

是用M13 Primer M3或RV还是两个一起用做上下游引物呢?
如果要人工合成的话,就按上面链接里的序列就可以了是吗?
5楼2008-04-11 07:49:11
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kristina_1982

新虫 (初入文坛)

用T3 primer或T7 primer也可以吗?
6楼2008-04-11 08:25:28
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renzhesichen

铁虫 (小有名气)

两个一起用,只要是配套的正反向测序引物就可以!
7楼2008-04-11 08:47:39
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kristina_1982

新虫 (初入文坛)

非常感谢!!
8楼2008-04-11 09:05:10
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