| 查看: 610 | 回复: 1 | |||
[求助]
酶活性测定 已有1人参与
|
|
我要测C-S lyase酶活性，文献里说：细胞破碎时，加入无菌玻璃珠然后漩涡，这个漩涡是指漩涡振荡器吗？ 酶反应液：Reaction mixtures[containing 0.2 mM 5,5′-dithiobis (2-nitrobenzoic acid)] (DTNB),100 μM PLP, 4 mM substrate, CFEs (approximately 30 μg protein)in 100 mM potassium phosphate (pH 7.5) solution]也没说反应液体积。那我应该按多少配啊？（如果我体积少了，酶粗提取液30微克，那底物不就不够了吗？会影响酶的活性吧）  |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有6人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有9人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
考博求助
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有4人回复
yunshenglmm
铜虫 (小有名气)
- 应助: 11 (小学生)
- 金币: 118.1
- 散金: 40
- 红花: 1
- 帖子: 291
- 在线: 69.8小时
- 虫号: 450868
- 注册: 2007-11-04
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
【答案】应助回帖
|
最近也在做酵母体外酶活测定，看资料酵母应该重悬在裂解缓冲液中，加等倍glassbeads，涡旋。有一种裂解缓冲液应该适合： Breaking Buffer 50 mM sodium phosphate, pH 7.4 1 mM PMSF (phenylmethylsulfonyl fluoride or other protease inhibitors) 1 mM EDTA 5% glycerol 1. Prepare a stock solution of your desired protease inhibitors and store appropriately. Follow manufacturer's recommendations. 2. For 1 liter, dissolve in 900 ml deionized water: 6 g sodium phosphate (monobasic), 372 mg EDTA, and 50 ml glycerol 3. Use NaOH to adjust pH and bring up the volume to 1 liter. Store at 4°C. 4. Right before use, add the protease inhibitors. |
2楼2014-08-02 14:11:52
