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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 凝胶电泳
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晒不干的鱼

新虫 (初入文坛)

[求助] 凝胶电泳 已有5人参与

不加cDNA的空白组，出现条带，求原因？
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晒不干的鲈鱼
1楼 2014-07-30 08:27:32
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biolinker

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-07-30 11:25:28
1、考虑操作过中所用的试剂是否有污染。
2、操作过程是否有污染。
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2楼2014-07-30 09:06:51
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songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-07-30 11:25:31
首先问题问的不清数，到底是直接将cDNA跑电泳还是以cDNA为模板PCR跑电泳？直接将cDNA跑电泳是应该看不到条带的，以cDNA为模板PCR跑电泳，空白组出现条带肯定是存在污染喽，要么是试剂污染，要么是电泳液没换，要么是气溶胶污染
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3楼2014-07-30 09:37:17
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未婚

金虫 (正式写手)

分子小生

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看条带大小咯，小的条带的话，说明是引物二聚体是！ 不过先确认没有dna污染和确实没有加CDNA
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You can't depend on luck, so you had better focus on the others!
4楼2014-07-30 12:16:58
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有没有跑胶的图片呀？放上来给大家看一看？
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坚持到底就是胜利！
5楼2014-07-30 15:51:38
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北化方华

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by songzuowei at 2014-07-30 09:37:17
首先问题问的不清数，到底是直接将cDNA跑电泳还是以cDNA为模板PCR跑电泳？直接将cDNA跑电泳是应该看不到条带的，以cDNA为模板PCR跑电泳，空白组出现条带肯定是存在污染喽，要么是试剂污染，要么是电泳液没换，要么是 ...

cDNA也能跑出条带。做反转录就需要电泳检验是否反转录成功。
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6楼2014-07-30 16:00:12
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songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 北化方华 at 2014-07-30 16:00:12
cDNA也能跑出条带。做反转录就需要电泳检验是否反转录成功。...

额。。。美女此言可有依据，小生表示不服，美女所说的cDNA条带是规整的带呢？还是弥散状一片的带呢？
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7楼2014-07-30 16:55:44
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北化方华

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by songzuowei at 2014-07-30 16:55:44
额。。。美女此言可有依据，小生表示不服，美女所说的cDNA条带是规整的带呢？还是弥散状一片的带呢？...

有规整的也有不清楚的，当时做就是为了验证下反转录是否成功。
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8楼2014-08-02 18:03:03
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Liz庆

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

是不是加样的时候漏到那个空白孔里了？

[ 发自小木虫客户端 ]
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Liz要做自由绽放的麻花
9楼2014-08-02 18:34:44
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songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 北化方华 at 2014-08-02 18:03:03
有规整的也有不清楚的，当时做就是为了验证下反转录是否成功。...

奥 规整的有可能是基因组残留 cDNA跑琼脂糖电泳不可能是规整带的 因为cDNA是单链 与EB是不好结合的
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10楼2014-08-04 09:43:54
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