24小时热门版块排行榜    

查看: 1262  |  回复: 6

aini_222925

金虫 (初入文坛)

[求助] 最近做荧光定量PCR总是阴性有扩增 已有1人参与

最近做荧光定量PCR总是阴性有扩增,阴性对照的模板是水,目前引物也换了,水也换了,枪也洗了,反应体系也换了,还是有扩增,天哪,问题到底出在哪,求大神指点迷津啊!
回复此楼
我是疯子我怕谁
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gniy

金虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
PCR管也顺便换一下呗。
2楼2014-07-28 16:21:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

荧光定量PCR总是阴性有扩增,这里的描述不清楚,阴性的表观Ct值是多少,还有PCR扩增产物做溶解曲线了吗?产物跑胶分析了吗?
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2014-07-28 16:24:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aini_222925

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gniy at 2014-07-28 16:21:18
PCR管也顺便换一下呗。

恩,换过了。
我是疯子我怕谁
4楼2014-07-28 16:42:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aini_222925

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2014-07-28 16:24:20
荧光定量PCR总是阴性有扩增,这里的描述不清楚,阴性的表观Ct值是多少,还有PCR扩增产物做溶解曲线了吗?产物跑胶分析了吗?

阴性Ct值在32左右,跟产物溶解度曲线TM值相同,没有跑胶。
我是疯子我怕谁
5楼2014-07-28 16:44:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

引用回帖:
5楼: Originally posted by aini_222925 at 2014-07-28 16:44:04
阴性Ct值在32左右,跟产物溶解度曲线TM值相同,没有跑胶。...

能否把溶解曲线的图上传上来看一下啊
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
6楼2014-07-28 16:52:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风灵之翼

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by aini_222925 at 2014-07-28 16:44:04
阴性Ct值在32左右,跟产物溶解度曲线TM值相同,没有跑胶。...

一般30以上都认为是没有模板,你这可能存在引物自连然后扩增的,定量中如果30个循环才有结果可以认为是较好的结果

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2014-07-29 01:22:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 aini_222925 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-18 02:06 by cITaGg3p5edr
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 6/300 2026-09-18 01:54 by cITaGg3p5edr
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-18 00:28 by cITaGg3p5edr
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 6/300 2026-09-17 23:05 by cuPZTDXS3VOd
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 8/400 2026-09-17 22:53 by cuPZTDXS3VOd
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:53 by ObVzqQQh1rrE
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 23jxep3nCNZb 2026-09-14 6/300 2026-09-17 13:29 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 23jxep3nCNZb 2026-09-14 6/300 2026-09-17 13:27 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 yaCh4X3wd045 2026-09-14 4/200 2026-09-17 13:17 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 mibUvS8DDCwf 2026-09-15 4/200 2026-09-17 06:26 by k06BKNblrGRH
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-17 03:52 by k06BKNblrGRH
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-17 02:38 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 16:00 by i3KBRD19ERkG
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-16 14:36 by i3KBRD19ERkG
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-16 06:36 by LH5NkK5Ud4bh
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 7/350 2026-09-16 02:35 by DgNGHc3h5tPl
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:14 by DgNGHc3h5tPl
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:35 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:50 by C79jjtjAKjEn
信息提示
请填处理意见