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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 如何测定包涵体变性液中的蛋白浓度？
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悬崖边的哭泣

新虫 (小有名气)

[求助] 如何测定包涵体变性液中的蛋白浓度？ 已有2人参与

情况是这样的，我将包涵体用6M盐酸胍溶解，想测定溶解的包涵体变性液中的总蛋白浓度，里面有低于10mM 的EDTA，还有100mM dTT，由于盐酸胍和高浓度DTT，不能直接用BCA，又不敢直接将盐酸胍稀释，怕蛋白沉淀。考虑过SDS-PAGE凝胶扫描，但我的目的蛋白表达量很低，凝胶中根本看不出来目的带，请各位高手指教！不甚感激！
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1楼 2014-07-28 14:45:49
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HHHH0099

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xiaobai1999 at 2014-07-29 09:24:07
还可以用bradford法测，有人说这个不受变性剂的影响。

请问一下，Bradford法你测定过么？可以指导下么？
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7楼2017-10-25 09:58:30
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xiaobai1999

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
悬崖边的哭泣: 金币+2 2014-07-28 17:37:15
thermo的BCA试剂盒可以忍受4M的盐酸胍，货号23225.
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2楼2014-07-28 16:22:12
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悬崖边的哭泣

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaobai1999 at 2014-07-28 16:22:12
thermo的BCA试剂盒可以忍受4M的盐酸胍，货号23225.

第一次发帖，你第一个回帖，很感谢你的回答。但我的样品DTT浓度高，不能直接用BCA试剂盒检测。

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-07-28 17:34:16
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xiaobai1999

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
悬崖边的哭泣: 金币+2 2014-07-29 13:25:51
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-31 14:26:06
还可以用bradford法测，有人说这个不受变性剂的影响。
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4楼2014-07-29 09:24:07
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