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悬崖边的哭泣

新虫 (小有名气)

[求助] 如何测定包涵体变性液中的蛋白浓度? 已有2人参与

情况是这样的,我将包涵体用6M盐酸胍溶解,想测定溶解的包涵体变性液中的总蛋白浓度,里面有低于10mM 的EDTA,还有100mM dTT,由于盐酸胍和高浓度DTT,不能直接用BCA,又不敢直接将盐酸胍稀释,怕蛋白沉淀。考虑过SDS-PAGE凝胶扫描,但我的目的蛋白表达量很低,凝胶中根本看不出来目的带,请各位高手指教!不甚感激!
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xiaobai1999

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
悬崖边的哭泣: 金币+2 2014-07-29 13:25:51
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-07-31 14:26:06
还可以用bradford法测,有人说这个不受变性剂的影响。
4楼2014-07-29 09:24:07
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xiaobai1999

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
悬崖边的哭泣: 金币+2 2014-07-28 17:37:15
thermo的BCA试剂盒可以忍受4M的盐酸胍,货号23225.
2楼2014-07-28 16:22:12
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悬崖边的哭泣

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaobai1999 at 2014-07-28 16:22:12
thermo的BCA试剂盒可以忍受4M的盐酸胍,货号23225.

第一次发帖,你第一个回帖,很感谢你的回答。但我的样品DTT浓度高,不能直接用BCA试剂盒检测。

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-07-28 17:34:16
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柠萌粉

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-07-31 14:26:16
bradford试剂盒,你值得拥有
5楼2014-07-29 13:39:45
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