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lentivirus 系统 过表达蛋白-感染MEF细胞多久后做二次感染合适?
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jessie06
木虫
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[交流]
lentivirus 系统 过表达蛋白-感染MEF细胞多久后做二次感染合适?
刚开始用lentivirus系统过表达蛋白,一10cm盘293T细胞收的病毒浓缩后感染了6孔板一个孔的MEF细胞,感染时密度20%左右,感染后48小时都没有看到荧光,不正常吧?不知道是什么问题(依据实验室师姐之前的经验来的,没有测滴度),所以准备拿冻存的病毒重新感染MEF细胞,并打算做连续感染,但不知道什么时候做二次感染合适?一次感染后24小时内?求各位大神指导。
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2014-07-26 17:25:06
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sylar1022
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引用回帖:
57楼
:
Originally posted by
jessie06
at 2014-07-27 11:47:17
是指感染12小时后直接二次感染么?中间不用换液恢复一段时间?...
感染十二小时,换正常液十二小时,再感染十二小时
[ 发自小木虫客户端 ]
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58楼
2014-07-27 14:54:17
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yuanyeguhong
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谢谢楼主!
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7楼
2014-07-26 17:34:23
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yuanyeguhong
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8楼
2014-07-26 17:34:39
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usky_4
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jessie06: 金币+2
2014-07-26 18:04:17
48小时候还没有看到荧光的确不太正常,不过MEF的确比较难感染。如果要做二次感染的话,24小时重复一次就可以。比如你可以今天做一次感染,明天再做一次感染。当然别忘了加感染用的试剂。
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12楼
2014-07-26 17:46:32
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pzx1004
4楼
2014-07-26 17:29
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jessie06(金币+1): 谢谢参与
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pzx1004
5楼
2014-07-26 17:29
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jessie06(金币+1): 谢谢参与
祝福
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wangyang7887
9楼
2014-07-26 17:39
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jessie06(金币+1): 谢谢参与
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