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jessie06

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[交流] lentivirus 系统过表达蛋白-感染MEF细胞多久后做二次感染合适？

刚开始用lentivirus系统过表达蛋白，一10cm盘293T细胞收的病毒浓缩后感染了6孔板一个孔的MEF细胞，感染时密度20%左右，感染后48小时都没有看到荧光，不正常吧？不知道是什么问题（依据实验室师姐之前的经验来的，没有测滴度），所以准备拿冻存的病毒重新感染MEF细胞，并打算做连续感染，但不知道什么时候做二次感染合适？一次感染后24小时内？求各位大神指导。

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1楼 2014-07-26 17:25:06

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jessie06

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引用回帖:

12楼: Originally posted by usky_4 at 2014-07-26 17:46:32
48小时候还没有看到荧光的确不太正常，不过MEF的确比较难感染。如果要做二次感染的话，24小时重复一次就可以。比如你可以今天做一次感染，明天再做一次感染。当然别忘了加感染用的试剂。

嗯我看到有说慢病毒表达时间较慢，荧光表达时间较长，所以有建议说96小时后检测荧光的？试剂您指polybrene吗？