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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 蛋白质过高效液相色谱的相关问题
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
要看蛋白的分子量大小，分子量太大的话，大于一万，就需要用大孔径的柱子，200,300A孔径的，如果是分子量几千，小于一万的话，可以考虑普通的分析柱；另外还要根据蛋白的疏水性强弱来选择，如果是亲水的蛋白的话，可以选C18，如果是疏水性较大的蛋白，只能选择短碳链的柱子了，如C8，C4，C5之类的
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人生若只如初见...
11楼2014-07-31 10:58:13
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chenzhengyi

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by guyifei2007 at 2014-07-30 22:30:24
现在不知道为什么我的样品第一次跑出峰但是以同样的条件跑第二次就不出峰...

说明你的C18柱可能被蛋白堵了。我用专用柱于实际样品分析的时候有时候也堵柱子，你试着用异丙醇冲下柱子吧。不过还是那句话，柱子最好专用的，HPLC-紫外检测器做蛋白没多大一样的，色谱的峰有时候不是峰啊；还有，就算出峰了你确定那峰是蛋白峰？
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有阳光的地方就会有阴影
12楼2014-08-01 17:34:01
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guyifei2007

木虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by Dionysius at 2014-07-31 08:36:49
你要看一下你的柱子孔径，蛋白最好选用300Å的。分子量10K左右的小蛋白可以用C18，分子量大的蛋白还是用C4或者C8吧...

我现在用的是一万多的蛋白 ，可以用C18码
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13楼2014-08-01 20:59:05
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guyifei2007

木虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by chenzhengyi at 2014-08-01 17:34:01
说明你的C18柱可能被蛋白堵了。我用专用柱于实际样品分析的时候有时候也堵柱子，你试着用异丙醇冲下柱子吧。不过还是那句话，柱子最好专用的，HPLC-紫外检测器做蛋白没多大一样的，色谱的峰有时候不是峰啊；还有， ...

那用异丙醇就能够洗码，这是什么原因你可以给我解释下吗  谢啦
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14楼2014-08-01 21:00:12
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管先生Tchen

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
蛋白蛋白~~~~~我也在做蛋白~好愁人
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15楼2015-05-18 10:22:46
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