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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 环境 » 交流探讨 » 标准溶液的高效液相色谱图，两个峰区分不开怎么办？
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求知者001

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[求助] 标准溶液的高效液相色谱图，两个峰区分不开怎么办？ 已有2人参与

7月24日下午做标准溶液（纯标样配制，混标，7种成分）高效液相出图，紫外检测器，如2014.7.24，各种物质是分开的，出峰较好，但这是第一次测试，就碰巧出现这种情况，老师也很惊讶。后来停电，中断，样品放在仪器中取不出来。
标准溶液的高效液相色谱图，两个峰区分不开怎么办？
2014.7.24下午.JPG
7月25日再做，出图跟24日差别很大，出峰时间全部提前，且有总是有两种组分分不开。后来重新取过标液后再测试，情况仍无改观。具体图见2014.7.25。
标准溶液的高效液相色谱图，两个峰区分不开怎么办？-1
2014.7.25-25.JPG
标准溶液的高效液相色谱图，两个峰区分不开怎么办？-2
2014.7.25-20.JPG
后来调整流动相，2014.7.25对比图（从上至下）分别为如下梯度洗脱：
上：乙腈         0.01M草酸                       中：                                                   下：
0     10%           90%                               0     10%        90%                           0     10%        90%
17   30%           70%                              17     20%       80%                           17     25%       75%
20   40%           60%                              20   40%         60%                           20   40%         60%
梯度洗脱变化的只是第17min是乙腈的比例。从图上看出，乙腈为25%、30%时第4、5个峰分不开，而25%似乎比30%要好那么一点点；20%时第1、2峰和第4、5峰都分不开。当乙腈＜15%时，只有六个峰。
标准溶液的高效液相色谱图，两个峰区分不开怎么办？-3
2014.7.25-对比.JPG
请问各位有经验的大侠，我该如何改进？急！
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人生最曼妙的风景，是内心的淡定与从容。
1楼 2014-07-26 06:54:04
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求知者001

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引用回帖:
5楼: Originally posted by wenrongti at 2014-07-26 11:10:51
你7.24的图不是挺好的吗，那时的流动相比例是多少？。。。峰分不开的话，流速打小点试试；用甲醇0.1流速冲洗柱子一晚上试试；有没有前人做过类似的，可以借鉴试试；如果只是定性分析，不用分开来也是可以的；分不开 ...

就是7.24那一次出图比较好，后来就分不开了。后来也试了那时的流动相比例，可是还是不行
我要定量额，光定性不行的。
做个实验各种局限啊~
你不应助没法给金币啊~
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7楼2014-08-03 20:42:35
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晓春儿

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
改变比例，试试能否

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阳光静好，我待如花
2楼2014-07-26 07:45:53
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引用回帖:
2楼: Originally posted by 晓春儿 at 2014-07-26 07:45:53
改变比例，试试能否

我试了很多比例，效果都不行，不知道你有没有具体的比例建议。。
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3楼2014-07-26 07:50:29
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求知者001: 回帖置顶 2014-07-26 07:53:06
从对比图中似乎可以得出这样的结论，第1、2峰分开要乙腈比例大一些，而第4、5峰分开又要乙腈浓度小一些。但是出峰是是1、2先出，4、5后出。这怎么办啊？
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4楼2014-07-26 07:52:56
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