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求知者001

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[求助] 标准溶液的高效液相色谱图,两个峰区分不开怎么办? 已有2人参与

7月24日下午做标准溶液(纯标样配制,混标,7种成分)高效液相出图,紫外检测器,如2014.7.24,各种物质是分开的,出峰较好,但这是第一次测试,就碰巧出现这种情况,老师也很惊讶。后来停电,中断,样品放在仪器中取不出来。
标准溶液的高效液相色谱图,两个峰区分不开怎么办?
2014.7.24下午.JPG
7月25日再做,出图跟24日差别很大,出峰时间全部提前,且有总是有两种组分分不开。后来重新取过标液后再测试,情况仍无改观。具体图见2014.7.25。
标准溶液的高效液相色谱图,两个峰区分不开怎么办?-1
2014.7.25-25.JPG
标准溶液的高效液相色谱图,两个峰区分不开怎么办?-2
2014.7.25-20.JPG
后来调整流动相,2014.7.25对比图(从上至下)分别为如下梯度洗脱:
上:乙腈         0.01M草酸                       中:                                                   下:
0     10%           90%                               0     10%        90%                           0     10%        90%
17   30%           70%                              17     20%       80%                           17     25%       75%
20   40%           60%                              20   40%         60%                           20   40%         60%
梯度洗脱变化的只是第17min是乙腈的比例。从图上看出,乙腈为25%、30%时第4、5个峰分不开,而25%似乎比30%要好那么一点点;20%时第1、2峰和第4、5峰都分不开。当乙腈<15%时,只有六个峰。
标准溶液的高效液相色谱图,两个峰区分不开怎么办?-3
2014.7.25-对比.JPG
请问各位有经验的大侠,我该如何改进?急!
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求知者001

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送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by wenrongti at 2014-07-26 11:10:51
你7.24的图不是挺好的吗,那时的流动相比例是多少?。。。峰分不开的话,流速打小点试试;用甲醇0.1流速冲洗柱子一晚上试试;有没有前人做过类似的,可以借鉴试试;如果只是定性分析,不用分开来也是可以的;分不开 ...

就是7.24那一次出图比较好,后来就分不开了。后来也试了那时的流动相比例,可是还是不行
我要定量额,光定性不行的。
做个实验各种局限啊~
你不应助没法给金币啊~
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7楼2014-08-03 20:42:35
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晓春儿

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
改变比例,试试能否

[ 发自小木虫客户端 ]
阳光静好,我待如花
2楼2014-07-26 07:45:53
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引用回帖:
2楼: Originally posted by 晓春儿 at 2014-07-26 07:45:53
改变比例,试试能否

我试了很多比例,效果都不行,不知道你有没有具体的比例建议。。
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3楼2014-07-26 07:50:29
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求知者001: 回帖置顶 2014-07-26 07:53:06
从对比图中似乎可以得出这样的结论,第1、2峰分开要乙腈比例大一些,而第4、5峰分开又要乙腈浓度小一些。但是出峰是是1、2先出,4、5后出。这怎么办啊?
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4楼2014-07-26 07:52:56
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