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huantao12

金虫 (小有名气)

[求助] 有关引物设计 已有5人参与

小弟刚涉足基因工程,有关问题想请教一下。在PCR设计引物的时候,我的目的序列已知,要扩增这段目的基因,引物不是应该就在这段目的基因的两端的位置吗?如果引物结合到其他位置,P出来的不就不是我要的目的基因了吗?求教
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songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-07-24 11:20:18
若扩目的基因的全长序列,引物要设计到目的基因的两端,你的引物若能结合到目的基因的其它地方,扩增出来的只能是目的基因的片段了
2楼2014-07-24 10:32:20
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panhp2004

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果P出来的片段大小与目的基因大小不符合,就是引物结合到其他位置了。
追梦是一个快乐的过程。
3楼2014-07-24 14:31:59
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-07-24 22:47:20
如果需要全长的基因,必须在2端设计引物。
如果只是检测有没有这个基因,在基因内设计引物就行。
4楼2014-07-24 17:36:49
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小松果2012

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-07-24 22:47:26
既然目的序列已知,要扩增这段目的基因,设计引物的时候根据目的序列设计就行了,反正软件会帮你分析引物是否合适的。一般的引物设计软件都可以,这个已不是什么难题了。
5楼2014-07-24 18:14:49
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huay13

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-07-24 22:47:35
你想要整条基因片段,就需要在两端设计引物,用oligo或者pp5都可以设计出来
食品是个坑
6楼2014-07-24 20:37:46
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