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qinglongwang

新虫 (小有名气)

[交流] 测得序列基因已导入大肠杆菌,为什么诱导后产生的蛋白与所求蛋白不一致? 已有4人参与

测得序列基因已导入大肠杆菌,为什么诱导后,电泳得到蛋白与所求蛋白不一致?是诱导方法不对?
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qinglongwang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2014-07-23 21:16:47
纯化了吗,还是测活性了,,western了吗?仅仅从大小有时候看不出问题的

没有纯化,也没有测得活性,只是根据电泳表现出蛋白30kD,而根据基因表达预测大小应该在20kD多一点点
3楼2014-07-23 21:52:56
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pennchem

专家顾问 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
纯化了吗,还是测活性了,,western了吗?仅仅从大小有时候看不出问题的
行至水穷处,坐看云起时
2楼2014-07-23 21:16:47
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
载体构建好后测序验证了吗?有可能发生移码突变或碱基突变导致翻译提前终止或未正常终止。
4楼2014-07-23 22:43:26
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qinglongwang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by stone2239 at 2014-07-23 22:43:26
载体构建好后测序验证了吗?有可能发生移码突变或碱基突变导致翻译提前终止或未正常终止。

做了五组,测了序列,全是正确的

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-07-23 22:51:15
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