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W格子

新虫 (初入文坛)

[求助] RAW264.7复苏细胞不贴壁 生长缓慢是怎么回事? 已有9人参与

我的细胞染菌了,重新复苏了一管。结果培养了一天,只有稀稀落落的很少量的细胞贴壁了,这是细胞死了的意思吗?
我寻思可能那些未贴壁的也不会再贴壁了,就换了液(含10%FBS的DMEM培养基),继续培养了,希望贴壁的那点儿能长起来。现在已经继续培养了两天了,看着好像比第一天多了一点点,有些是一坨坨的,有些是单个零星的分布着,但是仍然非常少。各位前辈遇到过这情况吗?我这可能是什么原因导致的呢?细胞还有希望长起来?我尝试再换液含20%血清的培养基养一下行吗?
急求指导~~  非常感谢~~
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一旺百旺

新虫 (著名写手)

首先看看细胞密度,包括没有贴壁的,大概知道你冻存的时候是不是细胞密度太低。如果太低状态不好也正常,细胞生长有一定的密度,要不生长很慢。到最后细胞状态可能也不会太好。复苏大约五个小时以后就要看看细胞状态,该加血清加血清,该换液就换液。很大程度上你冻的时候没有冻好,比如消化的时间不对,还有复苏的时候离心转速,还有复苏的时候可以用培养液离心两次来清洗。

[ 发自小木虫客户端 ]
11楼2014-07-25 10:08:59
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那个

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
W格子: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-07-23 22:43:02
慢慢等一下吧
只要没染菌,慢慢养着吧,就别老折腾它们了。
俺们中心提供各种分析测试,iso品质,有需要站内哈~~~~
2楼2014-07-23 12:44:09
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W格子

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 那个 at 2014-07-23 12:44:09
慢慢等一下吧
只要没染菌,慢慢养着吧,就别老折腾它们了。

好的吧  谢谢你
就是很害怕它长不起来了
3楼2014-07-23 22:42:36
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
W格子: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-07-24 23:09:10
首先确定你的培养条件没有问题,培养基里改加的都加了,培养基和血清都是合格的牌子和批次
然后确定你拿来复苏的细胞没有问题
再看看你的培养条件,二氧化碳还有吗,培养箱的水槽还有水吗,培养箱温度控制对不对,等等
如果一切都没问题,那就慢慢养吧
不需要换20%的
4楼2014-07-24 00:25:42
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