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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 样品ODS反相柱的洗脱条件怎么确定？
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雅漂

金虫 (小有名气)

[求助] 样品ODS反相柱的洗脱条件怎么确定？ 已有1人参与

新手过完正相硅胶柱，因为化合物极性较大，所以想用反相柱进行细分，但是完全不懂这个洗脱条件怎么确定，实验室有反相板，但不知道这个的这个跑了跟普通硅胶柱一样是用Rf在0.2-0.3之间来确定最终条件吗？还是怎么判断？找不到相关的资料，谢谢了！
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excelsior
1楼 2014-07-22 19:37:36
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

512303519

新虫 (初入文坛)
先液相分析一下啊，你所说的化合物极性大，什么条件可以溶解，一般大极性化合物反相的话在低的乙腈或甲醇就能洗脱出来，你需要的目标化合物是一个还是很多？先试一下等度，再梯度，也可以在5-100的乙腈梯度走一下，看看出峰时间。
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雅漂
7楼2014-07-25 19:27:30
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
雅漂: 金币+14, 因为液相不是很方便，如果用反相板要怎么确定洗脱的梯度呢？ 2014-07-23 17:20:27
就当做指纹图谱来走条件最好 但是一般制备液相的话 看你手上的制备液相是几元泵的了 这个和正相的rf0.2-0.3无关了

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2楼2014-07-22 23:08:35
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)
反相板子的话你肯定不能好好的确定梯度的 你顶多能大致跑板确定一下有机相等比例增加对样品的分离效果“通过主斑点来确认” 如果你想用梯度洗脱分离化合物的话最好还是直接用液相摸条件 用反相板来定条件大多费力不讨好 一般是用来反相中压柱过柱检测的（没有液相用的前提下）

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3楼2014-07-23 18:38:12
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雅漂

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by chenjiajiang198 at 2014-07-23 18:38:12
反相板子的话你肯定不能好好的确定梯度的 你顶多能大致跑板确定一下有机相等比例增加对样品的分离效果“通过主斑点来确认” 如果你想用梯度洗脱分离化合物的话最好还是直接用液相摸条件 用反相板来定条件大多费力不 ...

那做液相怎么确定梯度呢？

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excelsior
4楼2014-07-24 12:14:30
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 雅漂 at 2014-07-24 12:14:30
那做液相怎么确定梯度呢？
...

就常规的走适合液相制的备条件就是了撒

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雅漂
5楼2014-07-24 18:09:14
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雅漂

金虫 (小有名气)
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5楼: Originally posted by chenjiajiang198 at 2014-07-24 18:09:14
就常规的走适合液相制的备条件就是了撒
...

新手，不是很懂，能说详细点吗？

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excelsior
6楼2014-07-24 22:34:25
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xiaodong9105

木虫 (正式写手)
你可以先走一针线性比如 甲醇的比例从20%-100%  看看你的化合物都在什么时候出峰  估计出你化合物的大概极性 然后确定条件的时候把水的比例适当提高
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雅漂
Ittakesadreamtogetstarted,desiretokeepgoinganddeterminationtofinish
8楼2014-07-26 16:30:57
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雅漂

金虫 (小有名气)
送红花一朵
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7楼: Originally posted by 512303519 at 2014-07-25 19:27:30
先液相分析一下啊，你所说的化合物极性大，什么条件可以溶解，一般大极性化合物反相的话在低的乙腈或甲醇就能洗脱出来，你需要的目标化合物是一个还是很多？先试一下等度，再梯度，也可以在5-100的乙腈梯度走一下， ...

谢谢了，我先做下液相，有什么不懂再具体的问你们，都是高手呀！

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excelsior
9楼2014-07-26 20:21:14
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雅漂

金虫 (小有名气)
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引用回帖:
8楼: Originally posted by xiaodong9105 at 2014-07-26 16:30:57
你可以先走一针线性比如 甲醇的比例从20%-100%  看看你的化合物都在什么时候出峰  估计出你化合物的大概极性 然后确定条件的时候把水的比例适当提高

谢谢了，我先做一下液相再具体的问你们，嘿嘿

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excelsior
10楼2014-07-26 20:22:20
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