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喜气洋洋

金虫 (初入文坛)

[求助] 转化涂板后长斑慢,小,还有卫星斑

我做的是设计引物点突变,先目标突变片段的扩增,然后用胶回收、Dpn1酶切、转化DHa5感受态,涂板、挑斑摇菌,提质粒,用Xho1、Sac1、Sca1酶切4h,
PFACT-GFP载体用Xho1,Sac1酶切4h,然后载体和目标片段1:6比例,T4连接2h,16摄氏度。热激法转化感受态,涂板后的问题有长斑偏小(24h),慢,还有卫星斑。如下图。请虫友们,帮我看看,分析分析感谢!

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