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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 构建质粒
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cong葱

铜虫 (小有名气)

[求助] 构建质粒

虫虫侠们 现有一个质粒是经过pCAMBIA1300改造过得 想要在质粒上添加GFP基因 该怎么做?我在分子方面是个门外汉，很苦恼 没有一点头绪，还请各位大侠指点迷经~谢谢
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1楼 2014-07-17 16:42:17
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静谧limi

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用infusion行不行？
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2楼2014-07-17 18:40:23
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yipan

铜虫 (职业作家)
基因定点整合重组，很多公司都可以做。
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3楼2014-07-18 09:12:45
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xzy0425

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-18 15:39:34
首先，你应该清楚经改造过的质粒载体含有哪些酶切位点，酶切位点分布在哪里，同一种酶酶切位点有几个，从而选择合适的酶切位点，进而确定最佳的限制性内切酶。确定好酶切位点后，对你的目的基因进行分析处理，使其两端含有相应的酶切位点序列，进而通过酶切、连接、重组。
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4楼2014-07-18 11:39:16
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cong葱

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xzy0425 at 2014-07-18 11:39:16
首先，你应该清楚经改造过的质粒载体含有哪些酶切位点，酶切位点分布在哪里，同一种酶酶切位点有几个，从而选择合适的酶切位点，进而确定最佳的限制性内切酶。确定好酶切位点后，对你的目的基因进行分析处理，使其两 ...

谢谢 我该怎么知道酶切位点呢
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5楼2014-07-29 16:21:14
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xzy0425

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cong葱 at 2014-07-29 16:21:14
谢谢 我该怎么知道酶切位点呢...

你的质粒是怎么来的？若是别人送的，那赠送人应该有的。你也可以送给测序公司，让他们帮你测一下序列，根据序列分析含有哪些酶切位点。
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6楼2014-07-29 17:13:51
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