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xiaohehc371

铁虫 (初入文坛)

[交流] 关于毕赤酵母转化的疑问!

我一直在用pPIC9K链接基因,然后做毕赤酵母转化,Licl法和电转化法都做了,涂在MD平板上后,长得很好,典型的酵母菌落形态,可是只要一挑到MM平板上后就长势缓慢,虫们给提一下意见,为什么会这样呢?我的MM平板放了两个星期用的,怕甲醇没了,我每过24h就加100微升甲醇,可长势也太缓慢了,且菌落形态不像酵母啊!虫们,帮帮俺吧!都做了2月了!
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yxdhd

铜虫 (小有名气)

用

用的哪个酵母菌?
2楼2008-04-03 19:06:39
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黑罕

金虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
跳过MM筛选
直接用抗性筛选
用水将MD板涂起、混合
取少量在g418抗性板上筛选

同时换酵母菌试试

毕竟时间对我们很重要的
3楼2008-04-04 06:23:47
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11014612

银虫 (初入文坛)

★
reasonspare(金币+1,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
可能菌种有问题
好象有甲醇生长快型和甲醇生长慢型之分吧
4楼2008-04-05 23:29:17
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xiaohehc371

铁虫 (初入文坛)

感谢大家的支持啊,我用的是GS115;
5楼2008-04-07 13:45:40
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