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ATPase活性测定的反应液问题
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大家好，我现在正在做蔬菜的能量代谢，测ATPase的活性，方法是钼蓝法，660nm比色测定，如下， a、质膜：加入0.2 mL酶液，在35℃保温3 min，依次加入0.5 mL H+-ATPase反应液，100.0 μL 1 mM钼酸铵，100.0 μL 500 mM KNO3，100.0 μL 5 mM NaN3（叠氮钠），以0.2 mL 5 mmol·L-1ATP作激活剂启动反应，35℃反应20 min，加入0.2 mL 20%三氯乙酸终止反应。反应液于10000 rpm下离心10 min。取上清液0.5 mL，加入2.5 mL蒸馏水和2.0 mL 5%硫酸亚铁-钼酸铵试剂，放置1 min后于波长660 nm处测其OD值。以蒸馏水做对照。 我不明白的是，这个反应液是什么，是现买的，还是配制出来的？怎么配？里面都含有什么，含量是多少？ 由于我在这一行是新手，所以不太懂这个，哪位高人能指点一下啊，谢谢了。 |
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