| 查看: 4837 | 回复: 13 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
nisiying0701木虫 (正式写手)
stan
|
[求助]
蛋白中巯基和二硫键的测定 已有2人参与
|
||
|
测定总巯基含量时，15 mg蛋白样品溶解于5 mL含8 M 尿素的Tris-Gly 缓冲液（0.086 M Tris, 0.09 M Gly 和 0.04 M EDTA, pH 8.0）。测定自由巯基含量时，15 mg样品溶解于5 mL不含尿素的上述Tris-Gly 缓冲液中，而后加入50 μL Ellman 试剂 （DTNB, 即5,5-二硫基双2-硝基苯甲酸溶于Tris-Gly 缓冲液，4 mg/mL），在25℃条件下保温反应60 min, 离心（5000 g, 15 min），上清液在412 nm 处测定吸光值，以含Ellman 试剂的Tris-Gly 缓冲液为空白对照。 巯基含量的计算公式如下： SH (μmol/g) = 73.53×A ×D/C 式中：A —除去试剂空白后样品的吸光度值 D—稀释倍数 C—样品浓度（mg/mL） 请教各位大神，这种方法中稀释倍数（D）和样品浓度（C）是多少？怎么得出的？万分感谢！！！！ |
回复此楼
11楼2016-02-29 11:28:16
小毛孩24
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +383 - 食品EPI: 7
- 应助: 501 (博士)
- 贵宾: 0.029
- 金币: 1459.6
- 散金: 15124
- 红花: 75
- 帖子: 4433
- 在线: 782.9小时
- 虫号: 1230465
- 注册: 2011-03-12
- 专业: 食品科学基础
- 管辖: 食品
2楼2014-07-10 08:38:33
nisiying0701
木虫 (正式写手)
stan
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 4009.1
- 散金: 20
- 红花: 6
- 帖子: 440
- 在线: 139.2小时
- 虫号: 1278567
- 注册: 2011-04-26
- 性别: GG
- 专业: 天然有机化学
3楼2014-07-10 16:54:55
小毛孩24
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +383 - 食品EPI: 7
- 应助: 501 (博士)
- 贵宾: 0.029
- 金币: 1459.6
- 散金: 15124
- 红花: 75
- 帖子: 4433
- 在线: 782.9小时
- 虫号: 1230465
- 注册: 2011-03-12
- 专业: 食品科学基础
- 管辖: 食品
4楼2014-07-10 21:08:06