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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物信息 » 目的片段回收后浓度较低，如何浓缩？
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张冰宝

新虫 (小有名气)

[求助] 目的片段回收后浓度较低，如何浓缩？ 已有6人参与

我回收了我的目的片段，条带很暗且稍偏高，浓度有些低，连接表达载体一直连接不上，希望可以把我的目的片段浓缩一下。不知道该如何浓缩，希望知道的大侠们指点一下 谢谢
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1楼 2014-07-07 16:14:58
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茂林修竹7

金虫 (正式写手)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-07-16 19:52:03
引用回帖:
16楼: Originally posted by 张冰宝 at 2014-07-16 15:35:11
我还有个小问题想请教一下。我现在回收的目的片段是连完克隆载体后酶切回收的。测序显示有一些位点突变了。那么我按照你的方法扩增，其中突变的点会不会影响我的序列。换句话说pcr扩增完后的序列和我测序回来的序列 ...

有点不明白你的意思。你说的是克隆载体，是指T-vector吧？这个问题和你最初的问题不是一个吧？不明白你到底想问什么。
根据你测序的结果，有一个碱基突变，如果以此为模板（不考虑Taq酶的错配率），扩出来的pcr片段肯定也会有一个碱基突变的。
另外碱基突变不代表翻译的氨基酸序列的突变，你可以比对下 氨基酸序列，如果正确的话，也是可以用的。
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将欲取之必先与之
20楼2014-07-16 17:20:57
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for5

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
张冰宝(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-07-07 20:38:27
简单点的就是用胶回收盒子里面的柱子重新富集一遍

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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操蛋的XX
2楼2014-07-07 16:19:56
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2014-07-22 20:43:59
我们实验室有专门抽真空的仪器呢

[ 发自小木虫客户端 ]
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天道酬勤
3楼2014-07-07 23:12:13
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_深海渔_

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by for5 at 2014-07-07 16:19:56
简单点的就是用胶回收盒子里面的柱子重新富集一遍

我最近也遇到这方面问题，您能详细的讲一下吗？把纯化回收的DNA溶液放到柱子里然后重新离心吗？谢谢！

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2014-07-08 00:00:30
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