应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 单酶切问题！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 173  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

dan0411039

银虫 (小有名气)

[交流] 单酶切问题！

体系20ul
10*buffer  2ul
EcoRI        1ul    (15U/ul)
λDNA        2.5ul(1ug)
ddH2O      14.5ul
37°酶切2小时

出现电泳图中的这种现象？
从左到右依次是1Kb,λDNA /HindIII,λDNA ,三管一样的样品
请虫友帮帮忙，我在本科毕业生论文，快答辩了急急急！

[ Last edited by dan0411039 on 2008-3-29 at 21:59 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-03-29 21:43:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwfifa

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
reasonspare(金币+4,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.. 新虫鼓励奖2个, 让你更开心
可能是没有加去磷酸化酶（CIAP）吧,你再试试看吧
赞一下(10人) 回复此楼
2楼2008-03-29 22:41:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx, welcome
引用回帖:
Originally posted by wwfifa at 2008-3-29 15:41:
可能是没有加去磷酸化酶（CIAP）吧,你再试试看吧

酶切好象跟去磷酸化没关系吧?
我一般50微升体系,1微升内切酶,可能你加的有点多.
λDNA很好切,我们一般试验内切酶有没有活性,才切λDNA.另外你的电泳图片,是不是缓冲液有问题,也不是很清楚.建议换新的缓冲液重新跑一下电泳.

[ Last edited by 克隆大虾 on 2008-3-29 at 21:01 ]
赞一下(10人) 回复此楼
3楼2008-03-30 03:54:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jjeagle

新虫 (初入文坛)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):new one, two more
图中缺少无酶切的对照，怀疑原样品已坏
赞一下(10人) 回复此楼
4楼2008-03-30 04:20:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biogefart

木虫 (著名写手)
1.EcoRI有星号活力。
2.电泳缓冲液用的次数太多。
赞一下 回复此楼
闹太套
5楼2008-03-30 08:27:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dan0411039

银虫 (小有名气)

谢谢

谢谢，各位虫友的建议
赞一下 回复此楼
6楼2008-03-30 14:34:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charon1982

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
1、考虑你跑电泳的问题
2、酶切是否缩短时间
3、原DNA是否降解
赞一下(10人) 回复此楼
帮助虫友，提升自己
7楼2008-03-30 18:18:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tigerzh

铁杆木虫 (正式写手)
时间太长了好像
回复此楼
wherethereisawill,thereisaway!
8楼2008-03-30 18:25:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dan0411039 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 348求调剂 +5 小懒虫不懒了 2026-03-28 5/250 2026-03-29 10:34 by 唐沐儿
[考研] 279求调剂 +4 蝶舞轻绕 2026-03-29 4/200 2026-03-29 09:45 by laoshidan
[考研] 11408软件工程求调剂 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 21:50 by zhq0425
[考研] 322求调剂 +7 宋明欣 2026-03-27 7/350 2026-03-28 21:27 by sanrepian
[考研] 071000生物学求调剂，初试成绩343 +7 小小甜面团 2026-03-25 7/350 2026-03-28 20:25 by 唐沐儿
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +4 小张zxy张 2026-03-26 8/400 2026-03-28 19:25 by lbsjt
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +12 路痴小琪 2026-03-27 12/600 2026-03-28 15:41 by L135790
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +7 hanamiko 2026-03-27 7/350 2026-03-28 09:56 by 李上岸0921
[考研] 085404求调剂，总分309，本科经历较为丰富 +4 来财aa 2026-03-25 4/200 2026-03-28 07:41 by 棒棒球手
[考研] 材料求调剂 一志愿哈工大总分298分，前三科223分 +5 dongfang59 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:53 by wxiongid
[考研] 340求调剂 +5 jhx777 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:18 by fmesaito
[考研] 275求调剂 +10 jjjjjjjjjjl 2026-03-27 10/500 2026-03-27 23:47 by barnett0632
[考研] 一志愿南师大0703化学 275求调剂 +4 Ripcord上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-27 17:00 by zhyzzh
[考研] 284求调剂 +11 junqihahaha 2026-03-26 12/600 2026-03-27 04:37 by wxiongid
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 生物技术与工程 +3 1294608413 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:02 by 1294608413
[考研] 网络空间安全0839招调剂 +4 w320357296 2026-03-25 6/300 2026-03-25 17:59 by 255671
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪！？！
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭