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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 在对目的基因进行干扰后，筛单克隆的时候，为何铺完板之后 长不了多久 细胞就都死了
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表里不一的

新虫 (初入文坛)

[求助] 在对目的基因进行干扰后，筛单克隆的时候，为何铺完板之后 长不了多久 细胞就都死了 已有2人参与

我在真核细胞里对目的基因进行下调，但是在晒单克隆的时候，铺完板之后 ，开始长得挺好，为什么 不几天就开始死，而且是全部死亡。多次尝试都没有改善  请问怎么回事？  比较急  谢谢
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1楼 2014-06-30 10:43:05
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55liuyan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
表里不一的: 金币+1, ★有帮助, 谢谢 2014-06-30 15:12:52
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-30 21:01:33
表里不一的: 金币+1, ★有帮助, 谢谢 2014-07-01 16:58:39
这种情况的话有可能是这个基因本身的问题，它可能对于细胞生长是必要的，换句话说那是致死突变；另一方面就是，可能是你的转染过程或者是细胞培养过程出了问题，因为就算你不转染，如果细胞的条件不好它也是会死掉的。
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每日三省吾身，平静，定气
3楼2014-06-30 12:11:48
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表里不一的

新虫 (初入文坛)
谢谢了  细胞培养还是木有问题的
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2楼2014-06-30 11:30:49
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表里不一的

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 55liuyan at 2014-06-30 12:11:48
这种情况的话有可能是这个基因本身的问题，它可能对于细胞生长是必要的，换句话说那是致死突变；另一方面就是，可能是你的转染过程或者是细胞培养过程出了问题，因为就算你不转染，如果细胞的条件不好它也是会死掉的 ...

我的多克隆细胞状态挺好的，我也考虑过是致死突变，但是我的对照组单克隆也是没有存活，也就是说不单单是基因的问题吧
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4楼2014-06-30 15:12:25
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pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
表里不一的: 金币+1, ★有帮助, 2014-07-01 16:59:08
单克隆本身的存活率比较低，我们这一般用96孔板的话，在10%左右，也有很多细胞更低，所以用了个cellplaza，存活率能达到50%。一般要挑单克隆的细胞，都会先用有限稀释法验证一下单克隆能否长起来。
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5楼2014-07-01 08:52:16
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