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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 做RAPD的组织不经液氮预冷可以吗？
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fpliu

新虫 (初入文坛)

[求助] 做RAPD的组织不经液氮预冷可以吗？ 已有1人参与

新鲜植物组织材料，没经液氮预冷而是直接放入-80度超低温冰箱保存，适合提取DNA做RAPD吗？
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1楼 2014-06-29 16:35:01
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fpliu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuren2009 at 2014-06-29 23:21:45
关键是你提出DNA的量如何？液氮预冷提DNA是为了破壁。植物组织最好用液氮。

原来的程序是先经液氮预冷，才放入-80度超低温冰箱保存一段时间，因一时没液氮，就直接放入-80度保存，（研磨当然还是用液氮），这样对RAPD有影响吗？比如DNA断裂了？
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3楼2014-06-30 08:54:02
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yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fpliu(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-15 20:58:54
关键是你提出DNA的量如何？液氮预冷提DNA是为了破壁。植物组织最好用液氮。
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学习使你立于不败之地
2楼2014-06-29 23:21:45
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yuren2009

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
fpliu(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-06-30 21:06:25
引用回帖:
3楼: Originally posted by fpliu at 2014-06-30 08:54:02
原来的程序是先经液氮预冷，才放入-80度超低温冰箱保存一段时间，因一时没液氮，就直接放入-80度保存，（研磨当然还是用液氮），这样对RAPD有影响吗？比如DNA断裂了？...

RAPD对DNA要求不高。影响不大，我们提取真菌DNA的菌丝直接放在-80摄氏度的冰箱里，DNA又不是已经提出来的，提出来的反复冻融会有一定影响。存放要求没有这么严格，只要后期能成功提取DNA。
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学习使你立于不败之地
4楼2014-06-30 10:44:49
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