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足下客木虫 (正式写手)
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[交流]
表达质粒载体与克隆质粒载体有什么区别？
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我们实验室分离到了一株氧化葡萄糖酸杆菌，能够有效得提高某个催化反应。老师想让我提高一下，这株菌催化该反应的酶的表达量。因为大肠杆菌中没有这种酶的辅酶再生系统，所以要在氧化葡萄糖杆菌内部构建质粒，而现在关于这方面的文献很少。 目前通用的几种质粒都不能在此菌中稳定存在，所以老师让我从此菌的内源性质粒入手，构建一种新的质粒。 请问我要构建的这种质粒是不是属于表达质粒载体？这种质粒构建时与克隆载体的构建有什么区别吗？是不是难度会更大一些？ 我是一名新手，现在一点思路都没有，希望前辈们能多多指点。先谢过大家了 |
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足下客
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3楼2008-03-28 16:53:56
lxj341401
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表达质粒载体与克隆质粒载体有什么区别：功能和部件不一样。 克隆载体： （1）载体能够独立的复制； （2）具有灵活的克隆位点和方便的筛选标记。 表达质粒载体： （1）载体能够独立的复制； （2）具有灵活的克隆位点和方便的筛选标记。且克隆位点应在启动子序列后， 以使克隆的外源基因得以表达； （3）具有很强的Promoter，能为大肠杆菌的RNA聚合酶所识别； （4）具有Repressor，使启动子受到控制，只有当诱导时才能进行转录； （5）具有很强的终止子，以便使RNA聚合酶集中力量转录克隆的外源基因， 而不转录无关的基因。 （6）所产生的mRNA必须具有翻译的起始信号，即起始密码AUG和SD序列， 以便转录后能顺利翻译。 |
2楼2008-03-28 14:19:19
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4楼2008-03-28 17:08:54
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5楼2008-03-28 19:44:49
