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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 复生培养基为什么总喷
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571900696

金虫 (初入文坛)

[求助] 复生培养基为什么总喷 已有5人参与

大家使过SA5复生培养基吗？我的SA5复生培养基每次灭菌时都喷，灭完300ML最后只剩不到100ML，这是为什么呢？配方如下：

SA5复生培养基：（100ml）
丁二酸钠                   8.1g
酵母粉                      0.5g
酪蛋白水解物           0.5g
葡萄糖                      0.5g
Mgcl2.6H2O            0.406g
CaCl2                      0.139g
NaCl                           1g
Tris Base                 0.121g
琼脂                           5g

是什么成分导致喷呢？求指教！！！
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1楼 2014-06-23 16:41:20
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wangju87c

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
571900696: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2014-06-30 16:26:50
571900696: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2014-06-30 16:28:23
琼脂沸腾的时候就会喷，我之前都是事先将培养基的其他成分配好，最后加琼脂粉，在电炉上煮开搅匀，冷却前分装再灭菌，250ml的瓶子我加100ml-150ml，用的是棉花加纱布做的瓶塞，外面包4层报纸，从来没喷过。再有就是灭菌锅加压后降温，我是等到降至80℃以下再打开气门放气的。由于没有使用牛皮纸，我还会把湿的瓶子在烘箱里开100℃把报纸烘干再用
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哥已婚
12楼2014-06-24 12:01:17
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blckly

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
571900696: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2014-06-30 16:27:03
如果每次都喷，考虑灭菌条件改为115度15分钟，锥形瓶装液量不要超过一半，棉花塞做得蓬松透气一些，保存锥形瓶在灭菌锅里面稳定且瓶口向上，待压力锅压力指示为0，温度指示90度左右时小心缓慢放气，那样如果还是喷，那就真的是组成成分问题了，最后还可以尝试再减少锥形瓶装液量。
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13楼2014-06-24 13:22:23
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普通回帖

zhangyunjing

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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571900696: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-06-30 16:27:25
应该是灭菌时封口太严实，空气不流通，造成负压。灭菌时用面塞或者带有透性膜的封口膜封闭就行了
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rainwater
2楼2014-06-23 16:46:43
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你灭菌多少分钟啊？我感觉固体的最佳的是15min。
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
3楼2014-06-23 16:50:59
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571900696

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangyunjing at 2014-06-23 16:46:43
应该是灭菌时封口太严实，空气不流通，造成负压。灭菌时用面塞或者带有透性膜的封口膜封闭就行了

应该不是这个原因，之前灭别的培养基都没有这个现象，用的就是封口膜
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4楼2014-06-23 17:04:56
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571900696

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-23 16:50:59
你灭菌多少分钟啊？我感觉固体的最佳的是15min。

121℃,15min
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5楼2014-06-23 17:05:37
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★
571900696: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-06-30 16:27:42
用锡箔纸包或者是带有透气孔的塑料薄膜盖封上，你也可以将300ml分开做3个100ml的，这样会好些
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
6楼2014-06-23 17:09:51
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571900696

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-23 17:09:51
用锡箔纸包或者是带有透气孔的塑料薄膜盖封上，你也可以将300ml分开做3个100ml的，这样会好些

我用的就是有透气孔的塑料薄膜盖
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7楼2014-06-23 17:17:43
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人
引用回帖:
7楼: Originally posted by 571900696 at 2014-06-23 17:17:43
我用的就是有透气孔的塑料薄膜盖...

那你就分开来做吧，举例：做50ml的用100ml的瓶子
做100ml的用150的瓶子
以此类推
加油
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
8楼2014-06-23 17:30:41
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571900696

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-23 17:30:41
那你就分开来做吧，举例：做50ml的用100ml的瓶子
做100ml的用150的瓶子
以此类推
加油...

好吧，谢谢。琼脂如果多了会喷吗
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9楼2014-06-24 09:01:40
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学

【答案】应助回帖

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一般250ml的三角瓶不要超过200，150的配100，500的不超过400，用棉塞或者有透气孔的胶塞，一般不会喷的
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环境卫生、微生物学、卫生应急
10楼2014-06-24 11:17:13
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