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571900696

金虫 (初入文坛)

[求助] 复生培养基为什么总喷 已有5人参与

大家使过SA5复生培养基吗?我的SA5复生培养基每次灭菌时都喷,灭完300ML最后只剩不到100ML,这是为什么呢?配方如下:

SA5复生培养基:(100ml)
丁二酸钠                   8.1g
酵母粉                      0.5g
酪蛋白水解物           0.5g
葡萄糖                      0.5g
Mgcl2.6H2O            0.406g
CaCl2                      0.139g
NaCl                           1g
Tris Base                 0.121g
琼脂                           5g

是什么成分导致喷呢?求指教!!!
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wangju87c

银虫 (正式写手)

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★ ★
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571900696: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2014-06-30 16:26:50
571900696: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2014-06-30 16:28:23
琼脂沸腾的时候就会喷,我之前都是事先将培养基的其他成分配好,最后加琼脂粉,在电炉上煮开搅匀,冷却前分装再灭菌,250ml的瓶子我加100ml-150ml,用的是棉花加纱布做的瓶塞,外面包4层报纸,从来没喷过。再有就是灭菌锅加压后降温,我是等到降至80℃以下再打开气门放气的。由于没有使用牛皮纸,我还会把湿的瓶子在烘箱里开100℃把报纸烘干再用
哥已婚
12楼2014-06-24 12:01:17
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blckly

木虫 (小有名气)

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571900696: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2014-06-30 16:27:03
如果每次都喷,考虑灭菌条件改为115度15分钟,锥形瓶装液量不要超过一半,棉花塞做得蓬松透气一些,保存锥形瓶在灭菌锅里面稳定且瓶口向上,待压力锅压力指示为0,温度指示90度左右时小心缓慢放气,那样如果还是喷,那就真的是组成成分问题了,最后还可以尝试再减少锥形瓶装液量。
13楼2014-06-24 13:22:23
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普通回帖

zhangyunjing

金虫 (小有名气)

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571900696: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-06-30 16:27:25
应该是灭菌时封口太严实,空气不流通,造成负压。灭菌时用面塞或者带有透性膜的封口膜封闭就行了
rainwater
2楼2014-06-23 16:46:43
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飞约疯人院

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科学怪人

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你灭菌多少分钟啊?我感觉固体的最佳的是15min。
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
3楼2014-06-23 16:50:59
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571900696

金虫 (初入文坛)

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2楼: Originally posted by zhangyunjing at 2014-06-23 16:46:43
应该是灭菌时封口太严实,空气不流通,造成负压。灭菌时用面塞或者带有透性膜的封口膜封闭就行了

应该不是这个原因,之前灭别的培养基都没有这个现象,用的就是封口膜
4楼2014-06-23 17:04:56
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571900696

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-23 16:50:59
你灭菌多少分钟啊?我感觉固体的最佳的是15min。

121℃,15min
5楼2014-06-23 17:05:37
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

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571900696: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-06-30 16:27:42
用锡箔纸包或者是带有透气孔的塑料薄膜盖封上,你也可以将300ml分开做3个100ml的,这样会好些
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
6楼2014-06-23 17:09:51
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571900696

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-23 17:09:51
用锡箔纸包或者是带有透气孔的塑料薄膜盖封上,你也可以将300ml分开做3个100ml的,这样会好些

我用的就是有透气孔的塑料薄膜盖
7楼2014-06-23 17:17:43
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

引用回帖:
7楼: Originally posted by 571900696 at 2014-06-23 17:17:43
我用的就是有透气孔的塑料薄膜盖...

那你就分开来做吧,举例:做50ml的用100ml的瓶子
做100ml的用150的瓶子
以此类推
加油
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
8楼2014-06-23 17:30:41
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571900696

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-23 17:30:41
那你就分开来做吧,举例:做50ml的用100ml的瓶子
做100ml的用150的瓶子
以此类推
加油...

好吧,谢谢。琼脂如果多了会喷吗
9楼2014-06-24 09:01:40
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学

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一般250ml的三角瓶不要超过200,150的配100,500的不超过400,用棉塞或者有透气孔的胶塞,一般不会喷的
环境卫生、微生物学、卫生应急
10楼2014-06-24 11:17:13
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