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郑在爱你

银虫 (小有名气)

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专业: 细胞生物学研究中的新方法

[交流] CIK细胞对肿瘤细胞杀伤实验

最近在做CIK细胞对肿瘤细胞杀伤实验，过程是：1，肿瘤细胞用1640养好后，用1640制成细胞悬液，铺板。 2, 4小时后弃去板内上清，把用无血清培养基培养成熟的CIK细胞按不同比例制成细胞悬液，加到96孔板中。同时设好不同细胞数的单独CIK细胞孔。培养48小时。 3，加MTT液，培养4小时。翻板弃上清，加DMSO，震荡，490nm测OD值。
而我的疑问是：1，铺肿瘤细胞，我用的是肿瘤细胞的培养基，4小时后加CIK细胞时，我是应该用CIK细胞的培养基还是肿瘤细胞的培养基呢？如果用CIK细胞的培养基，需要把孔内肿瘤细胞的培养基弃掉吗？ 2，可以肿瘤细胞，CIK细胞一起铺板吗？如果可以，应该使用哪种培养基呢？3，加MTT液时，孔内有约200微升的培养基，直接加MTT液就可以吗？MTT液已配成5mg/mL，加MTT液不用考虑工作浓度吗？4，可以适当减少MTT作用时间吗？4小时对我来说，实验不太方便。
希望大家多多帮忙回答，谢谢~~~~

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