应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 蛋白浓缩，质谱
52/1返回列表
查看: 2236  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xiaoyu0127

铜虫 (小有名气)

[求助] 蛋白浓缩，质谱 已有3人参与

打算做某个蛋白的质谱。蛋白纯化后，浓度太低，western可以检测，可是无法考染或者银染看是否纯。请教，如何保持蛋白活性的前提下将目前约4ml的蛋白溶液浓缩至约100微升(用PEG20000已经初步浓缩)。另外，做质谱的话银染考染都可以吧，样品制备有什么要求。跪求大虾指点。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-06-22 14:41:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
14楼: Originally posted by xiaoyu0127 at 2014-06-27 11:14:31
是这样，我是用抗原抗体亲和层析，对抗体要求量很大，抗体购买的明显较少，所以我只能积少成多。
...

能不能用别的方法来纯化
赞一下 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
15楼2014-06-27 19:36:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

anyaxiong

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-06-23 08:24:38
用超滤的方法应该没问题，买个超滤管也就100快的样子
赞一下 回复此楼
爱拼才会赢
2楼2014-06-22 16:40:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoyu0127

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by anyaxiong at 2014-06-22 16:40:33
用超滤的方法应该没问题，买个超滤管也就100快的样子

可以控制得到的量吗，一个管子针对同一种样品可以反复使用吗

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
3楼2014-06-23 10:22:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

馒头爱生物

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蛋白浓缩用3k离心管就可以，时间有点长的话，注意加蛋白酶抑制剂防止降解。
打质谱的话银染考染都可以，不跑胶提供蛋白溶液也可以，但是要提供溶液的成分，方便别人判断应该帮你怎么处理蛋白，因为溶液里很多成分对质谱有影响，要先处理再进行。
质谱的灵敏度特别高，无论做什么处理，请一定要带口罩和手套，有条件的话带帽子，否则你会在自己的质谱检测报告中看到很多keratin角蛋白的。
赞一下 回复此楼
4楼2014-06-23 15:42:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭