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summit061800

新虫 (初入文坛)

[求助] Taq酶 已有2人参与

上周五时做pcr还好好的，所有样品都有条带，可是周一再做时怎么做都没有条带，先后换了buffer，dntp还有水也没有p出来，后来换了支酶，就p出来了。我想让各位帮我分析一下是什么原因导致我的酶失活的？以后我应该注意些什么？ps：酶平时保存在-20度冰箱里，做pcr过程中置于冰盒上。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2014-06-19 21:30:09
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zep616745243

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
summit061800(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-20 10:34:53
Taq酶也没那么脆弱，考虑下是否为次品酶，我们用的PCR Mix经常在室温放半个小时都还行，不过做实验还是小心为好，低温使用
赞一下 回复此楼
只有不断地失败才会成功
3楼2014-06-19 22:53:43
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
summit061800(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-20 10:34:43
降低温度冷藏保存，但是不能太低，我们的通常是-25℃，加杨的时候不要放置在外面时间过长，会失活降解的
赞一下 回复此楼
人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
2楼2014-06-19 22:03:33
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