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summit061800

新虫 (初入文坛)

[求助] Taq酶 已有2人参与

上周五时做pcr还好好的,所有样品都有条带,可是周一再做时怎么做都没有条带,先后换了buffer,dntp还有水也没有p出来,后来换了支酶,就p出来了。我想让各位帮我分析一下是什么原因导致我的酶失活的?以后我应该注意些什么?ps:酶平时保存在-20度冰箱里,做pcr过程中置于冰盒上。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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zep616745243

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
summit061800(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-20 10:34:53
Taq酶也没那么脆弱,考虑下是否为次品酶,我们用的PCR Mix经常在室温放半个小时都还行,不过做实验还是小心为好,低温使用
只有不断地失败才会成功
3楼2014-06-19 22:53:43
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
summit061800(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-20 10:34:43
降低温度冷藏保存,但是不能太低,我们的通常是-25℃,加杨的时候不要放置在外面时间过长,会失活降解的
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
2楼2014-06-19 22:03:33
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