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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶切NcoI
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liumikewolf

金虫 (小有名气)

[交流] 酶切NcoI

T载体pMD19连接扩增片段后转化，转化子提质粒，用NcoI酶切，居然得到了三条带！这怎么可能呢？！请虫友们指教！
[search]酶切NcoI[/search]
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1楼 2008-03-25 23:16:49
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annwt

木虫 (正式写手)
是怎样的三条带？
限制酶有时由于条件的问题还会有Star活性，会在相似位点切开，分析你 的基因中有此类位点吗？
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3楼2008-03-26 07:33:46
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biogefart

木虫 (著名写手)
为什么不可能？好好分析一下你的gene，生物实验一切皆有可能。
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闹太套
2楼2008-03-26 06:39:44
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liumikewolf

金虫 (小有名气)
如何分析类似位点呢？NcoI 是我设计的酶切位点，在该基因片段上没有NcoI酶切位点，但不知道类似位点又是什么？
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4楼2008-03-26 12:47:04
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ypan

木虫 (著名写手)
原因可能如下：1，Nco I 酶可能有部分产生Star活性；2，你的插入片段可能有Nco I 酶的识别序列！
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5楼2008-03-26 13:04:02
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