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liumikewolf

金虫 (小有名气)

[交流] 酶切NcoI

T载体pMD19连接扩增片段后转化,转化子提质粒,用NcoI酶切,居然得到了三条带!这怎么可能呢?!请虫友们指教!
[search]酶切NcoI[/search]
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biogefart

木虫 (著名写手)

为什么不可能?好好分析一下你的gene,生物实验一切皆有可能。
闹太套
2楼2008-03-26 06:39:44
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annwt

木虫 (正式写手)

是怎样的三条带?
限制酶有时由于条件的问题还会有Star活性,会在相似位点切开,分析你 的基因中有此类位点吗?
3楼2008-03-26 07:33:46
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liumikewolf

金虫 (小有名气)

如何分析类似位点呢?NcoI 是我设计的酶切位点,在该基因片段上没有NcoI酶切位点,但不知道类似位点又是什么?
4楼2008-03-26 12:47:04
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ypan

木虫 (著名写手)

原因可能如下:1,Nco I 酶可能有部分产生Star活性;2,你的插入片段可能有Nco I 酶的识别序列!
5楼2008-03-26 13:04:02
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