24小时热门版块排行榜    

查看: 691  |  回复: 10
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

tody4617

木虫 (小有名气)

一根筋家族之独根草

[交流] 关于原核表达和SDS-PAGE

我用IPTG诱导BL21表达,载体是PGEX-4T-2,然后SDS-PAGE,发现电泳条带十分模糊,不知什么原因,请高手帮忙!
回复此楼

» 猜你喜欢

票子-房子-车子-婆子-儿子
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

long0553299

我个人觉得你的问题是缓冲液的PH没调!
上层浓缩胶的Tris-cl PH应调至6.8一定要准,胶是否清晰取决于浓缩胶浓缩的过程;第二,电泳液PH8.3,不准也会影响清晰度呢;3,分离胶 Tris-cl PH8.8.
9楼2008-03-26 22:35:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

yufuxian

木虫 (著名写手)


tody4617(金币+1,VIP+0):谢谢!!
是不是你跑电泳时,胶配的有问题,或是电泳缓冲液的问题,建议重新配制.
2楼2008-03-25 23:09:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人

marker如何?如果模糊就是胶的问题或电泳掌握的不好,如果清晰说明样品有问题。
细推物理须行乐。
3楼2008-03-26 08:18:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yufuxian

木虫 (著名写手)

有的时候你的菌煮沸时没有裂解开也会出现这样的问题.
5楼2008-03-26 12:53:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见