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可溶性蛋白在沉淀里面,不在上清液肿么办啊
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简牧风爱
新虫
(初入文坛)
应助: 1
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虫号: 2680436
注册: 2013-09-25
专业: 森林资源信息学
【答案】应助回帖
建议小试检测
你需要上清表达,下面情况或许对你有用
1、降低诱导温度,最低可到15℃
2、降低IPTG浓度,0.1mM都可
3、构件时,考虑前面或后面带有增加可溶性的标签蛋白,GST等
4、诱导开始OD,高浓度不利于上清形成
5、诱导时间,当然时间往往影响表达量
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11楼
2014-07-12 19:24:17
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简牧风爱
新虫
(初入文坛)
应助: 1
(幼儿园)
金币: 22.1
帖子: 19
在线: 7.5小时
虫号: 2680436
注册: 2013-09-25
专业: 森林资源信息学
【答案】应助回帖
补充我的回答
有可能你表达的蛋白是一种胶体形式,破碎时加入低于4M的脲,助溶,不会使蛋白变性
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12楼
2014-07-12 19:28:01
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