应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于酶切
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
41/1返回列表
查看: 136  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

skkyy88888

铜虫 (著名写手)

[交流] 关于酶切

我想回收连接在体载体上的目的条带然后和PET连接，我想问下，切多少质粒才够呢？大家的大量酶切体系是怎么弄的？谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-03-25 10:59:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenqicc

金虫 (小有名气)
一般要看你是单酶切还是双酶切了，我一般都是参看买来的Takara的内切酶的说明书的，切的总体系一般20μl就够了，除了加的酶和缓冲液之外全加的质粒！~~
赞一下 回复此楼
Publish OR Perish!
2楼2008-03-25 11:08:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ypan

木虫 (著名写手)
为什么要双酶切？用PCR重新P一次，比你切胶回收的要多得多！只要你的引物上有对应的酶切位点，PCR之后，纯化产物，然后双酶切，纯化酶切产物，与用同样酶切载体连接就可以了！
当然PCR电泳时候要只有一条目的条带才可以用纯化试剂盒，要是有其他的带，还是要切胶回收！但是方法还是差不多！
祝你好运！
赞一下 回复此楼
3楼2008-03-25 11:17:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

long0553299

直接切也是可以的,不过量回收量可能会少点,建议20u体积;或者用三楼的方法,重设一对引物加酶切位点的,PCR产物5u,15u体系就OK了,这样做的成功率高一点
赞一下 回复此楼
4楼2008-03-25 11:37:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 skkyy88888 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 329求调剂 +8 钮恩雪 2026-03-25 8/400 2026-03-29 10:24 by 唐沐儿
[考研] 生物学学硕，一志愿湖南大学，初试成绩338 +6 YYYYYNNNNN 2026-03-26 7/350 2026-03-28 20:52 by 唐沐儿
[考研] 347求调剂 +3 山顶见α 2026-03-25 3/150 2026-03-28 14:13 by 唐沐儿
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-27 6/300 2026-03-28 14:10 by 唐沐儿
[考研] 266分，求材料冶金能源化工等调剂 +7 哇呼哼呼哼 2026-03-27 9/450 2026-03-28 12:22 by zllcz
[考研] 材料277求调剂 +7 min3 2026-03-24 7/350 2026-03-28 11:39 by xuxiang
[考研] 求调剂 +4 零八# 2026-03-27 4/200 2026-03-27 18:07 by yu221
[考研] 307求调剂 +8 超级伊昂大王 2026-03-24 9/450 2026-03-27 15:34 by 超级伊昂大王
[考研] 一志愿211，335分，0856，求调剂院校和导师 +4 倾____萧 2026-03-27 5/250 2026-03-27 11:52 by zhshch
[考研] 312求调剂 +9 上岸吧ZJY 2026-03-22 13/650 2026-03-27 11:24 by sanrepian
[考研] 359求调剂 +4 王了个楠 2026-03-25 4/200 2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[考研] 材料考研求调剂 +3 Dendel 2026-03-23 6/300 2026-03-26 17:51 by fmesaito
[考研] 352求调剂 +4 大米饭！ 2026-03-22 4/200 2026-03-26 16:40 by 不吃魚的貓
[考研] 081700 调剂 267分 +11 迷人的哈哈 2026-03-23 11/550 2026-03-26 15:41 by zzll406
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap－ 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭