应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 电泳没条带 请高手帮我分析分析 拜托大家
81/1返回列表
查看: 978  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

shji03zhangjing

铜虫 (小有名气)

[交流] 电泳没条带 请高手帮我分析分析 拜托大家

今天实验课，提取的DNA,OD260/OD280=1.76,还算可以，可是经过PCR扩增，电泳却没条带，不知道是怎么回事。加样孔处很亮，跟同学们一起跑的，应该不是胶的问题，因为没接触过这个，所以请大家帮我分析分析,谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-03-24 22:27:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

GinTonic

金虫 (小有名气)
应该是没有扩出来吧
赞一下 回复此楼
2楼2008-03-24 23:48:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuchang

金虫 (初入文坛)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.不敢确定你的方法,先送一个.
可能是模板加多了，你把模板稀释100倍再PCR试试
赞一下(10人) 回复此楼
3楼2008-03-25 01:45:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

greenspringmi

银虫 (正式写手)
样孔里有东西，有可能是蛋白抽提的不干净。
你的提取方法是CTAB的话，可以用苯酚和氯仿抽提三次，尽量把蛋白除干净
赞一下 回复此楼
4楼2008-03-25 09:30:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skkyy88888

铜虫 (著名写手)
PCR能不能出来有很多原因，不光是模版的问题，包括PCR的体系程序等很多问题。再找下其他原因吧，也可以电泳鉴定下你的模版DNA。
赞一下 回复此楼
5楼2008-03-25 10:31:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangjian8411

应该先用琼脂糖电泳泡泡看你的DNA模板如何，看看是否是DNA降解还是蛋白质含量太高，如果这两者都不是，那就证明你的模板没有问题了。下一步应该去看看你的PCR反应体系有没有问题，有没有少加什么药品。如果没有就要看看你的PCR程序了，加样孔比较亮，说明你是用的琼脂糖胶跑的电泳，而不是用的聚丙烯酰胺胶，可以试试用聚丙烯酰胺胶，分离比较明显。从加样孔比较亮，可能是你的样有问题了，应该是蛋白质含量比较多，蛋白质跑的比DNA慢，所以一般来说会留在加样孔附近
赞一下 回复此楼
6楼2008-04-17 09:38:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

再见苏摩

银虫 (初入文坛)
同意楼上的，不过我觉得没必要改用聚丙烯酰胺胶，它不存在分离问题吧

首先要问下，你扩增的带有多大，如果带比200bp还小，胶跑久了很容易看不见的，如果带比较大，PCR失败几率要大些

再者，模板很重要，你仅检测了OD值，应该先点样看看浓度

PCR的东西加样孔处很亮应该不是模板蛋白质多的原因——模板在整个PCR体系中含量很少了.....我们偶尔会遇到这样的情况，有可能是污染了，不过基本可以忽略它带来的影响，也就是说它应该不是你没有扩增带的原因
赞一下 回复此楼
7楼2008-04-17 11:12:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 shji03zhangjing 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 1Nb0IVlmV6v0 2026-11-11 4/200 2026-11-13 11:18 by Equinoxhua
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 gRND4NVAZ8VG 2026-11-11 5/250 2026-11-13 11:15 by Equinoxhua
[考博] 27博士申请（市政/环境） +3 ladf 2026-11-12 3/150 2026-11-13 08:19 by Equinoxhua
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 6/300 2026-11-13 04:21 by Equinoxhua
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 czAiolzR0IJC 2026-11-10 6/300 2026-11-12 16:55 by zzy933268
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 6/300 2026-11-12 12:42 by ECLTXnJnRSXf
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:11 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 6/300 2026-11-12 11:00 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:27 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:16 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:08 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +7 FChKX8meu1ds 2026-11-09 9/450 2026-11-12 10:03 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 09:41 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +8 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 12/600 2026-11-12 09:32 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 5/250 2026-11-12 08:15 by HajghKOMynmz
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 3/150 2026-11-12 07:53 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-12 05:30 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:00 by 9fOTqj074tIg
[考博] 申请环境，微生物方向博士 +3 浅笑09 2026-11-08 3/150 2026-11-10 12:44 by 可淡不可忘
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭