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synhily木虫 (正式写手)
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[交流]
高手指教一下怎样使此图片清晰及酶切不完全的问题
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请教大家，怎样使得我的电泳图片变清晰。【4】Marker，从上到下的大小为200，500，800，1500，2000，3000，5000，共7条带。【3】我需要的是在309，718和614分别有三条带，309和718的两条可以看见，但是614看不清楚（我认为是614和718离得较近，导致614那条带看不清楚，也许专家认为没有酶切出614来）；另外1332处那条带由于没有完全切开而存在，它的存在也不能算错。【2】564和977处有两条带，是我所希望的；1641处同样有一条没有酶切完全的带。【1】酶切的就是这个大小的DNA片段。 希望高手指教： 1，如何使得我的图片变清晰，您能具体的说下使用的软件及修改的详细过程吗？ 2，导致酶切不完全的原因是什么呢？ （100微升的反应体系，60微升TE溶解后，取5微升的DNA样品，酶用量从1增加到2微升，酶切时间从4个小时增加到过夜，pcr后的产物经过了2次纯化，经pcr扩增、割胶回收的产物分别用ddH20和TE缓冲液回收）这些方法我都试过了，可是，酶切还是不完全，高手不吝赐教！ |
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8楼2008-03-24 20:16:45
synhily
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4楼2008-03-24 15:11:59
6